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2014 年 第 9 卷 第 1 期 ，81—89 生 态 毒 理 学 报 A sian J ou rn a l of E co toxico log y V 0 1．9 ．20 14 N o ．1，8 1-89 D O I：10 ．7 52 4 ／A J E ．16 73 —5 8 97 ．2 0 13 03 0 80 0 1 云丹 ，刘晓丽 ，程乐华 ，等．双酚 A 对斑马鱼精巢性激素生成酶基因表达的影响[J】．生态毒理学报，2014，9(1)：81-89 Yu n D ，L iu X L ，C h eng L H ，et a1．A lteration s in the mR NA s of enzy mes resp ons ib le for sex st eroidog enes is in t he t es t~ o f zeb raf i sh expos ed t o bisphenol_A [J]．A sian Journal of Ecotoxicolog y，2014，9(1)：81-89 (i n Chi n ese) 双酚 A 对斑 马鱼精 巢性激 素生成 酶基 因表 达的影响 云丹 ，刘晓丽 ，程 乐华 ，周忠 良 华东师范大学生命科 学学院，上海 200241 收稿 日期 ：：2013—03—08 录用 日期 ：2013-4-23 摘要 ：为了解环境雌激素对鱼类精巢 发育 的影 响 ，将成年雄性斑 马鱼(Danio 砌 )暴露于不同浓度双酚 A ( 0、500、1 000、2 000、 4 O00~g · L )下 21 d，并在此基础上 ，进一步研究了暴露在相 同浓度(BPA 2 000 g · L )不 同暴露时 间下各基 因表达的动力学 模 式 。用荧光定量 PCR(qRT—PCR)方法检测试验鱼精巢性激 素合成相 关细胞 色素 P450 酶类基 因(CYP17 、CYP11B 和 CYP19A ) 以 及雌 、雄激 素受 体和促卵泡激素受体(ERa 、ERI3、A R 和 F SHR)基因 的表达 ，用 常规组织学方法研究试验鱼精巢结构 的变化 。结 果表 明，BPA 促进了精巢 内源雌激素合成相关酶类基 因 CYP19A 和雌激素受体 ERa mRNA 、ERIB mRNA 的表达 ，且 BPA 浓度 为 2 000 g · L。时 3 者的表达量显著上调 ，同时随着暴露时 间的延长 ，具有明显 的时间累积效 应。l 000 g ·L BPA 可导致 斑 马鱼精巢 CY P17 mRNA 的表达量显 著下 调 ，BPA 2 000 g · L 暴露 12 d 引起 了 CYP1l B mRNA 表达下调 ，而随着暴露 时间的延 长有所 回升 ，但 它对 精巢 A R mRNA 的表达却无 明显影响 。同时 ，BPA 500 g · L。引起 了 F SHR 基 因 的显著 上调 ，在时间动态 学上 ，呈上 升趋 势。在组 织学上 ，2 000 Ixg · L BPA 引起斑马鱼精巢生精小管 内精 子浓缩严 重 ，精原细胞(sg)和精母 细胞(PS 和 ss)数 目都有 所减 少，BPA 4 000 g · L 组斑 马鱼精巢退化 。因此 ，BPA 可诱 导精 巢内源雌 激素合 成和雌激 素受体 的表达 ，提 高雌 激素效应 ，通过抑制 CY P17 基 因的表达 ，一定程度上抑制雄激素 的合成 ，从而引起斑马鱼精 巢组织 的破 坏。 同时 ，据实验 数据 推测 ，雄激素 的下调 可能启 动了下丘脑一垂体-性腺(HPG)轴 的负反馈 调节机制 ，而此作用机制还有待进一步研究 。 关键 词 ：双酚 A ；斑马鱼 ；精 巢 ；性激 素合成相关基 因 文章编 号 ：1673—5897( 2014) 1—081-09 中图分类号 ：X 171． 5 文献标识码 ：A A ltera ti ons in the m R N A s of E nzy m es R esponsible for S ex S ter oidogenesis in the T estis of Z ebr af i sh E x posed to B isph enol· A Y u n D a n ，L iu X ia oli，C h en g L eh ua ，Z h ou Z h on g lian g S c h o o l o f L ife S c ien c e ，E as t C h in a N o rma l U n iv ers ity ，Sh an g h ai 20024 1，C h i n a R eceiv ed 8 M arc h 20 13 ac cept ed 23 A p ril 2013 A b str act ：In order to elu c id at e th e effect o f different c on c ent rat io n s of an env iro n ment al es tro g en o n test ic u - lar development in f i sh，male adult zebraf i sh (1) anio rerio) were exposed to 0，500，1 000，2 000 and 4 000 g ·L bisphenol A (BPA ) for 21 day s ．Then ，another group of male zebraf i sh were ex p osed to 2 000 lxg ·L BPA f o r th e tim e—c o urse g en e ex p ress io n analy s is ．T h e mR N A s o f C Y P4 50 en zy m es resp o n sib le f o r s ex s teroid sy nt he— sis (CY P17，CYP 1 1B，CY PI9A )，estrogen receptor (ERa)，estrogen receptor p (ERp)，androgen receptor (A R)， and follicle··stimulati ng hormone receptor (FSHR) were quantif i ed usi n g real--ti m e polymerase chai n reactions 基金项 目：上海 自然科学基金(No．08ZR14073001 作 者简介 ：云丹 (1988一) ，女 ，硕士研究生 ，研究方向 ：水生生物毒 理学；E-mail：yundan125@ 163． cor n 通 讯作 者(Correspondi n g author) ，E—m a i l ：zhouzl@ m a i l ． ecnu．edu．cn