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    188宝金博页面版: 牛血清白蛋白与槲皮素在不同溶剂中相互作用特征及抗氧化性的研究

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    内容提示： 第３４卷 ， 第１期　 　　　　　　　　　　　光２ ０ １ ４ 年 １ 月　　　　　　　　　　　 。樱 ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｓ ｃｏｐｙ ａｎｄ Ｓｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ａ ｌ Ａｎ ａ ｌｙ ｓ ｉ ｓ谱学与光谱分析Ｖｏ ｌ．３４，Ｎｏ ．１，ｐｐ１６２１６６Ｊａｎｕ ａ ｒ ｙ，２０１４　牛血清白 蛋白 与槲皮素在不同溶剂中相互作用特征及抗氧化性的研究董 学艳， 姚惠 芳， 任发政， 景　浩中 国 农业大学食品 科学与营养工程学院， 188宝金博页面版部功能乳品 重点 实验室， 北京。保埃埃埃福痴∫￠纹に赜肱Ｑ灏 蛋白 的相互作用机理以 及影响 因 素的 研究对于生物活 性小 分子与 生物大分子的相互作用方式及其功能改变具有一定理论和实际意义。 运用荧光光谱、 紫外可见光谱、 同 步荧光光谱、 自 由基清除方法（ＤＰＰＨ 和 ＡＢＴＳ 自 由 基清除率）， ...

    文档格式：PDF | 页数：5 | 浏览次数：124 | 上传日期：2015-03-06 01:50:28 | 文档星级：
    第３４卷 ， 第１期　 　　　　　　　　　　　光２ ０ １ ４ 年 １ 月　　　　　　　　　　　 。樱 ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｓ ｃｏｐｙ ａｎｄ Ｓｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ａ ｌ Ａｎ ａ ｌｙ ｓ ｉ ｓ谱学与光谱分析Ｖｏ ｌ．３４，Ｎｏ ．１，ｐｐ１６２１６６Ｊａｎｕ ａ ｒ ｙ，２０１４　牛血清白 蛋白 与槲皮素在不同溶剂中相互作用特征及抗氧化性的研究董 学艳， 姚惠 芳， 任发政， 景　浩中 国 农业大学食品 科学与营养工程学院， 188宝金博页面版部功能乳品 重点 实验室， 北京。保埃埃埃福痴∫￠纹に赜肱Ｑ灏 蛋白 的相互作用机理以 及影响 因 素的 研究对于生物活 性小 分子与 生物大分子的相互作用方式及其功能改变具有一定理论和实际意义。 运用荧光光谱、 紫外可见光谱、 同 步荧光光谱、 自 由基清除方法（ＤＰＰＨ 和 ＡＢＴＳ 自 由 基清除率）， 研究了 牛 血清白 蛋白 与 槲皮素 在水、 二甲 基亚砜和 乙 醇三种不同溶剂中 的相互作用方式及其对槲皮素抗氧化 性的 影 响 。 结果表明 ： 槲皮素 对牛 血清白 蛋白 有 较强 的 荧光猝灭作用， 且为静态与动态并存的复合猝灭方式， 相互作用力 为疏水作用力 。 三种溶剂 中 ， 牛 血清白 蛋白与槲皮素的结合常数和结合位点 数由 大到小依次为 ： 水＞二甲 基亚砜＞乙 醇， 结合距离由 大到小依次为 ： 乙醇＞二甲 基亚砜＞水。 根据结合距离的大小可知 ， 结合作用由 强到弱 依次为 ： 水＞二甲 基亚砜＞乙 醇。 在三种溶剂 中 牛血清白 蛋白 的酪氨酸和色氨酸残基同时参与 与 槲皮素的 相互作 用。 未结合及结合牛 血清白 蛋白的槲皮素与 ＤＰＰＨ 自 由 基清除率均为３０％， 未结合及结合牛血清白 蛋白 的槲皮素与 ＡＢＴＳ 自 由 基清除率相比 ， 由８０％显著降低到７０％。 三种溶剂对未结合及结合牛血清白 蛋白 的 槲皮素的 自 由 基清除能力 无显著性影响。关键词　牛血清白 蛋白 ； 槲皮素； 荧光光谱； 紫外可见光谱； 同步荧光光谱； 抗氧化中 图分类号： Ｏ ６５７ ．３　　文献标识码： Ａ　　　犇犗 犐：１０ ．３９６４／ｊ ．ｉ ｓ ｓｎ ．１０００ ０５９３（２０１４）０１ ０１６２ ０５　收稿日 期：２０１３ ０４ ０１， 修订日 期：２０１３ ０７ １５　基金项目 ： 国 家自 然科学基金项目 （３１１７１６７６） 资助　作者简介 ： 董学艳， 女，１９８３ 年生， 中 国 农业大学食品 科学与营养工程学院博士研究生　。 ｍ ａ ｉ ｌ：ｄｏｎｇｘｕ ｅｙ ａｎ １９８５＠１２６ ．ｃｏｍ通讯联系 人　。 ｍ ａ ｉ ｌ：ｈ ａｏ ｊ ｉｎｇ＠ｃ ａｕ ．ｅｄｕ ．ｃｎ引　言　　牛血清白 蛋白 （ｂｏｖ ｉｎ ｅｓｅ ｒｕｍａ ｌｂｕｍ ｉｎ，ＢＳＡ） 是血浆中 含量最丰富的蛋白 质， 有重要的运载和 存储功 能， 可 以 与 许多小分子物质发生相互作用。ＢＳＡ 是由５８３ 个氨基酸残基组成的单肽链蛋白 质，Ｃ 端为丙氨酸残基， Ｎ 端为天冬氨酸残基，含有２０ 个酪氨酸残 基， 在１３４ 及２１２ 位各含有 一 个 色 氨 酸残基， 其中 ， 色氨酸２１２ 位于ＢＳＡ 的 重要 结合位点 Ｓ ｉ ｔ ｅ Ⅱ，而色氨酸１３４ 则处于分子的表面［１］。槲皮素（ｑｕ ｅ ｒ ｃ ｅ ｔ ｉｎ， ＱＵＥ） 具有 很 强 的 抗 氧 化 性 和 广 泛的生物活 性， 如 抗炎、 降血压、 抗血糖升高、 癌细 胞生 长 抑制等［２］。ＱＵＥ 由 Ａ，Ｂ 和Ｃ 三个芳香环组成， 其骨架结构上３，５，７，３ ′和４ ′位的氢 原子被 羟基取代 形 成的 五羟基黄酮。ＱＵＥ 在中 性 条件下 很 不 稳 定， 在ｐＨ 为７ ．４ 的 磷 酸 缓 冲 液中 ， 很快发生氧化， 半衰期 为１０ ｈ化合物的结合， 可以 减缓黄酮类化合物 的 氧化 进程， 从而保护黄酮类化合物［４，５］。［３］。 蛋白 大分子与 黄酮 类ＢＳＡ 与黄酮类 化 合 物 相 互 作 用 的 影 响 因 素 较 多， 如 溶剂 、ｐＨ 和金属 离子的存在， 其中 溶剂 对ＢＳＡ 与 黄酮 类化 合物相互作用的 影 响 不 容忽 视。 研究 表明 不 同 溶 液 中 ＢＳＡ 与黄酮类化合物的 结 合 常 数 和 作 用 力 类 型 不 同［６ ８］。 然 而， 诸多的文献仅仅局限于单一 溶液中 ＢＳＡ 与 黄酮 类 化 合物 相 互作用的研究， 没有 比 较不 同 溶 剂 对ＢＳＡ 与 黄 酮 类 化 合 物 相互作用的影响及对黄酮类化合物抗氧化性的影响 。本文研究水、 二甲 基亚砜和乙 醇等三种 常用 溶剂 对牛 血清白 蛋白 与槲皮素间 相互作用的影响， 通过荧光光谱研究二者相互作用方式、 相互作用力 类型； 通过紫 外可 见光谱和 荧光光谱研究二者的结合距离， 通过同步荧光光谱研究槲皮素对牛血清白 蛋白 色氨酸残基和酪氨酸残基微环境的 影响， 并通过ＤＰＰＨ 和 ＡＢＴＳ 法评价牛 血清白 蛋白 的 结合对 槲皮 素抗氧化性的影响。１　实验部分１ １　试剂与仪器牛 血 清 白 蛋 白 （ｂｏｖ ｉｎ ｅ ｓｅ ｒｕｍ ａ ｌｂｕｍ ｉｎ， ＢＳＡ； 纯 度 大 于９８％， 购 自 美 国 ＡＭＲＥＳＣＯ 公 司 ）， 槲 皮 素 （ｑｕ ｅ ｒ ｃ ｅ ｔ ｉｎ，.

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