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    188宝金博页面版: 牛粪发酵沼液对立枯丝核菌的抑制作用

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    内容提示： 第 29 卷2013 年第 3 期2 月农 业 工 程 学 报Vol.29No.3Transactions of the Chinese Society of Agricultural EngineeringFeb. 2013207牛粪发酵沼液对立枯丝核菌的抑制作用李文涛， 范金霞， 李文哲※， 袁（东北农业大学工程学院， 哈尔滨 150030）虎摘养基表面分别均匀涂布 1 mL 5 种不同处理的沼液， 即不作处理沼液、 沼液灭菌、 离心上清液、 无菌膜滤液和菌体溶液， 中心接种立枯丝核菌并于生化培养箱中 28℃培养 96 h， 每 12 h 测量立枯菌落的生长直径以计算抑制率， 同时借助分子生物学手段鉴定了 沼液中起抑制作用的微生物。 试验结果表明菌体溶液和不作处理...

    文档格式：PDF | 页数：7 | 浏览次数：40 | 上传日期：2015-03-06 01:50:11 | 文档星级：
    第 29 卷2013 年第 3 期2 月农 业 工 程 学 报Vol.29No.3Transactions of the Chinese Society of Agricultural EngineeringFeb. 2013207牛粪发酵沼液对立枯丝核菌的抑制作用李文涛， 范金霞， 李文哲※， 袁（东北农业大学工程学院， 哈尔滨 150030）虎摘养基表面分别均匀涂布 1 mL 5 种不同处理的沼液， 即不作处理沼液、 沼液灭菌、 离心上清液、 无菌膜滤液和菌体溶液， 中心接种立枯丝核菌并于生化培养箱中 28℃培养 96 h， 每 12 h 测量立枯菌落的生长直径以计算抑制率， 同时借助分子生物学手段鉴定了 沼液中起抑制作用的微生物。 试验结果表明菌体溶液和不作处理沼液对立枯的抑制效果较好， 抑制率最高可达 74%和 53%， 离心上清液的抑制效果次之， 无菌膜滤液和沼液灭菌处理的抑制作用较弱， 一般在 20%以下； 对沼液中的微生物菌群进行了分离、 纯化与筛。 获 16 株菌种， 并与立枯丝核菌进行对峙培养试验， 其中 nfd-9 和 nfd-16 具有较强抑制作用， 其他菌株几乎没有抑制作用。 将 nfd-9、 nfd-16 与立枯对峙交界面处进行了扫描电镜观察， 结果显示： 这 2 株微生物通过竞争、 拮抗和重寄生等作用来抑制立枯丝核菌的生长，从而到达防止病害的目的。 经分子生物学技术鉴定， 确定了 nfd-9 和 nfd-16 分别为米根霉菌（Rhizopus oryzae） 和哈茨木霉（Trichoderma harzianum）。 研究结果为进一步了解沼液抑制真菌的机理提供一定的理论参考。关键词： 抑菌性， 植物， 疾病控制， 牛粪发酵沼液， 立枯丝核菌， 米根霉， 哈茨木霉doi： 10.3969/j.issn.1002-6819.2013.03.028中图分类号： S 216.4文献标志码： A要： 为探讨牛粪发酵沼液的抑菌机理， 以立枯丝核菌为研究对象， 进行了试验研究。 采用平皿培养方法： 培文章编号： 1002-6819(2013)-03-0207-06李文涛， 范金霞， 李文哲， 等. 牛粪发酵沼液对立枯丝核菌的抑制作用[J]. 农业工程学报， 2013， 29(3) ： 207－21 2.Li Wentao, Fan Jinxia, Li Wenzhe, et al. Antibacterial mechanism ofcow manure biogas slurry on Rhizoctonia solani[J].Transactions ofthe Chinese Society ofAgricultural Engineering (Transactions ofthe CSAE), 2013, 29(3): 207－212. (inChinese with English abstract)0引言?为实现畜禽粪便的无害处理和资源化利用， 国家出台了系列政策推进中国新能源沼气产业发展，预期到 2015 年， 中国将拥有约 8000 处大型沼气工程、 10 万处中小型沼气工程和 78 万处养殖专业户规模沼气装置[1]。 随着沼气工程的快速推进和发展，其副产物沼液沼渣日益丰富， 若不及时处理将造成二次环境污染。沼液中含有丰富的矿物质元素、白酶以及氨基酸等多种营养成分[2-6]， 养分可利用率高， 能迅速被作物吸收利用[7]， 沼液中氮、 磷、 钾齐全， 能为农作物提供丰富的营养元素[8]， 是优质的有机液体肥料[9-10]。 在提高作物产量、 改善农产维生素、蛋收稿日期： 2012-10-12修订日期： 2013-01-22基金项目： “十二五” 国家支撑计划课题： 寒冷地区干湿耦合发酵气、热、 电联供技术集成与示范（2011BAD15B04）； 黑龙江省188宝金博页面版厅科学技术研究项目： 沼液特性数据库建立及抑菌机理研究。作者简介： 李文涛（1983－）， 男， 河北衡水人， 博士生， 主要从事生物质能源转化工艺及设备研究。 哈尔滨150030。 Email： yuesetingquan@163.com东北农业大学工程学院，※通信作者： 李文哲， 男， 教授， 博士生导师， 主要从事生物质能源研东北农业大学工程学院， 150030。Email： liwenzhe9@163.com究。 哈尔滨品品质等方面具有很好的利用价值[11]。 沼液除了有肥力的特性外， 还具有防病抑菌的作用， 研究表明沼液对某些植物病原菌有明显的抑制作用， 是理想的化学农药代替品[12]。 但目前对沼液抑菌的机理尚不能完全明确， 这与沼液自身成分受发酵原料以及沼气工程运行工艺等多种因素的影响， 不同沼液特性的差异很大[13-19]， 从而导致沼液应用植物病害防治的研究结论缺乏统一性和科学性。 本研究首先利用沼液对西瓜枯萎病菌、 大豆枯萎病菌、 茄根腐病菌、 小麦赤霉病菌和大豆菌核病菌 5 种真菌进行了抑菌预试验， 结果表明沼液对大豆枯萎病菌的抑制作用最明显， 而大豆枯萎病致病菌为立枯丝核菌，为了研究沼液对其的抑制作用， 以牛粪发酵沼液和立枯丝核菌为研究对象， 阐述沼液中起抑制作用的因子， 为进一步了 解沼液抑制真菌的机理提供参考。1材料与方法1. 1试验材料与培养基供试病原菌： 立枯丝核菌， 由东北农业大学园艺学院提供。试剂： 葡萄糖， 分析纯； 琼脂， 生物试剂； 新

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