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188宝金博页面版: 环氧合酶-2对人胃癌细胞SGC-7901迁移能力及上皮钙粘素表达的影响

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内容提示: ·论 著 · 中国临床医生杂志 2018年 第46卷 第4期 环氧合酶.2对人胃癌细胞 SGC.7901迁移能力及上皮 钙粘素表达的影响 韩黎丽 ,陈小兵 ,吕慧芳,王丹,王茂勋 ,罗素霞(郑州大 学附属肿瘤 医院 河南省肿瘤 医院, 河南 郑州 450000) 摘 要: 目的 探究不同环氧合酶-2(COX-2)表达水平对胃癌细胞 SGC-7901迁移能力及其上皮钙粘素 (E—cadherin)表达的影响。方法 采用不同浓度的 COX-2特异性抑制剂塞来昔布 (10、20、30、40、50~mol/ L)干预胃癌细胞 SGC-7901作为实验组,另设对照组 (不加塞来昔布干预),构建不同 COX-2表达水平 的胃 癌细胞 SGC-7901,采用 Transwell小室...

文档格式:PDF | 页数:3 | 浏览次数:4 | 上传日期:2022-08-28 13:55:38 | 文档星级:
·论 著 · 中国临床医生杂志 2018年 第46卷 第4期 环氧合酶.2对人胃癌细胞 SGC.7901迁移能力及上皮 钙粘素表达的影响 韩黎丽 ,陈小兵 ,吕慧芳,王丹,王茂勋 ,罗素霞(郑州大 学附属肿瘤 医院 河南省肿瘤 医院, 河南 郑州 450000) 摘 要: 目的 探究不同环氧合酶-2(COX-2)表达水平对胃癌细胞 SGC-7901迁移能力及其上皮钙粘素 (E—cadherin)表达的影响。方法 采用不同浓度的 COX-2特异性抑制剂塞来昔布 (10、20、30、40、50~mol/ L)干预胃癌细胞 SGC-7901作为实验组,另设对照组 (不加塞来昔布干预),构建不同 COX-2表达水平 的胃 癌细胞 SGC-7901,采用 Transwell小室法检测胃癌细胞 SGC-7901迁移情况。以终浓度为 30 t xmol/L的塞来 昔布干预胃癌细胞 SGC-7901,通过作用不同时间(24、36、48小时)构建不同 COX-2表达水平 的胃癌细胞 SGC一7901,采用免疫荧光标记法检测 胃癌细胞 SGC-7901 E.cadherin表达情况 ;采用实时荧光定量反转录 PCR检测胃癌细胞 SGC-7901 COX-2及 E.eadherin mRNA表达情况。结果 对照组及实验组(10、20、30、40、 50~mol /L)COX.2 mRNA表达量分别为(1.00+0.O0)及(0.82+0.15)、(0.70~0.29)、(0.62+0.25)、(0.49+ 0.21)、(0.33±0.15);E.cadherin mRNA分另0为 (1.00~0.O0)及 (0.73±O.16)、(1.38±O.22)、(2.43±0.21)、 (2.66+0.34)、(2.87+0.28)。与对照组比较 ,实验组胃癌细胞 SGC-7901 COX一2 mRNA表达量均显著降低 , E—eadherin mRNA表达量显著升高,且均呈剂量依赖性(P<O.O1)。Transwell小室实验结果显示,与对照组比 较 ,实验组 胃癌细胞 SGC.7901迁移数量均显著降低 (P<O.O1),实验组随 COX.2表达水平的降低呈逐渐降 低趋势(P<O.01),迁移抑制率呈逐渐升高趋势 (P<O.01)。以终浓度为 301 ~mol/L塞来昔布处理胃癌细胞 SCC一7901 24、36、48小时后 COX-2 mRNA表达量分别为(0.69±0.23)、(0.55±O.17)、(0.42~=0.11);E—cad. herin mRNA表达量分别为(2.46+0.23)、(4.03+0.31)、(5.11±0.28);SGC-7901 E.eadherin平均荧光强度分 别为(21.25+4.32)、(27.67±5.01)、(46.38±4.92);随着塞来昔布作用时间的延长,胃癌细胞 SCC.7901 COX-2 mRNA表达量逐渐降低 ,而 E.eadherin mltNA表达量及平均荧光强度均逐渐升高(P<O.05)。结论 通过 COX-2特异性抑制剂塞来西布抑制胃癌细胞 SGC-7901 COX-2表达 ,可显著上调其 E.cadherin mRNA。 进而抑制胃癌细胞 SGC一7901迁移能力 关键词 : 胃癌;塞来昔布;环氧合酶-2;胃癌细胞 SGC-7901;上皮钙粘素 中图分类号 :R735.2 文献标识码 :A 文章编号 :2095—8552f2018)04—0444—03 doi:10.3969/j.issn.2095-8552.2018.04.023 . 胃癌是全球高发 的恶性肿瘤之一 ,恶性肿瘤 的迁 移能力决定了其恶性程度及 患者预后 ,也是肿瘤致死 的关键因素之一 _J]。环氧合酶-2(COX-2)是花生 四烯 酸转化为前列腺素 2的限速酶 ,其参 与肿瘤血管生成 及肿瘤迁移 ,与 胃癌 的发生密切相关 [2]。恶性肿瘤细 胞侵袭转移过程 中均伴有细胞黏附分子及其介导的黏 附行为等异常变化 。上皮钙粘素 (E.cadherin)是重要 的黏附分子之一 .对于维持细胞间连接具有重要作用 , 也参与细胞信号转导 :其在抑制恶性肿 瘤细胞 由原发 病灶脱落、浸润及淋巴结转移等过程中均具有关键性 作用 ,被认为是肿瘤侵袭 的重要抑制 因子[3]。本研究 旨在 探究 COX-2对 胃癌细胞 SGC-7901迁移 能力及 E.eadherin表达 的影 响 。 基金项 目:国家 自然科学基金面上项 目(81472714) 通信作者 1 资料与方法 1.1 材料 胃癌细胞 SGC.7901由中国科学院上海生 命科学研究 院馈赠 。塞来昔布购于江苏盛迪 医药有 限 公司 ;RPMI.1640培养基 ,购于美 国 Gibeo公 司;胎牛 血清购于浙江省杭州 四季青公 司;胰 蛋 白酶、ECM胶 , 购于美 国 Sigma公司;所涉及引物 由日本 TakaRa公 司 设计、合成;RNA提取试剂盒、SYBP~Premix ExTaq , 购于 日本 TakaRa公 司;Transwell小室 .购于美 国 Milli. pore公 司 ;兔 抗 人 COX一2、E—cadherin多 克 隆抗 体 、 FITC标记的羊抗兔 IgG二抗 .均购于美 国 Bioworld公 司等。SW—CJ型超净工作 台 ,购于苏州净化集 团安泰 公司 :SHEL.LAB2300型 CO,培养 箱 ,购 于美 国 SHEL. DON公 司:ROTOR.GEN 3000型实时定量 PCR仪 .购

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