188宝金博页面版

第 23 卷第 4 期 2003 年 8 月 国外医学 · 生理、 病理科学与临床分册 F oreign Medi cal Sc ienc es·Sec tion of P athophy sioi ogy and C lini cal Me d ic ine V o1． 23 A ug． No． 4 200 3 MD一 2—— T0U 样受体 的重要辅助分子 熊建琼综述 朱佩芳蒋建新 审校 ( 第三军医大学大坪医院野战外科研究所四室， 重庆40o042) 摘要 ：MD-2 是 1999 年发现 的能与 T LR4 胞 外 区结合 并能促进 TLR4 转导 LPS 信号 的重要 分子 。它不仅 能促 进 TLR4 的表达、 影响 TLR4 在细胞内的分布、 促进 TLR4 与 LPS 的结合 ， 还能直接 与 LPS 结合 ， 并通过与 TLR4 胞 外区结合， 促进细胞对 LPS 的反应性； 而且 MD-2 还能通过与TL P ,2 胞外 区结合促进细胞对 LPS、 肽聚糖、 磷壁酸、 G 细茵及 G‘ 细茵的敏感性。 关键词 ：内毒素； MD-2； TLR ； 信号转导 中图分类号：Q513 ． 2 文献标识码： A 文章编号：1001-1773(2003)04-0391-02 Toll 样受体家族( Toll·like Receptors， TLRs) 在介 导人类及哺乳动物的天然免疫反应中起重要作用 ， 研 究已证实 TLR4 是跨膜转导内毒素( LPS) 信号的重要 受体分子 ， TLR4 基 因敲除小 鼠对 LPS 刺激无反应。 然而研究 也发现， 转染 了 TLR4 的 HEK293 细胞 ( 对 LPS 无反应 的人胚胎 肾细胞 ) 对 LPS／ sCD14 并不反 应， NF． KB 的活性也未见增强。该结果提示 LPS 经过 TLR4 跨膜转导的信号途径中还缺乏一个必不可少的 因子 。1 999 年 Miyake 发现 了一 种 能协 同 r几R4 信 号 转导 的蛋 白质 MD-2 ， 它 能与 TLR4 胞外 区结 合并 促进 细胞对 LPS 的反应 。 1 人 MD-2 的组 织表达分布 和结构特 点 人类编码 MD-2 的基 因已被克隆并测序 ， 该基因 位于第 8 号染色体? ， 约含有 624 个碱基对 ， 其开放 阅读框编码 160 个氨基酸的多肽链 _2 J 。B 细胞 、 树突 状细胞 、 单 核细胞 、 巨噬 细胞 和血 管 内皮 细胞均 有 MD-2。 鼠 MD-2 与人 MD-2 有 64％ 的同源性 【 MD-2 是一 种分泌型 糖蛋 白 ， 缺乏 跨膜 区 ， 能被 表 达 MD-2 的细 胞 直接 分 泌 到 细 胞 外 ， 转 染 了 MD-2 的 HEK293 细胞 ， 能在 其培 养上 清 液 中检测 到 MD-2[ MD-2 也能 通过 与 TLR4 胞外 区结 合 而定 位 于细 胞表 面。仅 转 染 MD-2 的 Ba／ F3 细 胞 ， 虽 然 能在胞 内检测 到 MD-2 前体 ， 但在细胞表面却检测不到 MD-2， 而在 共同表达 TLR4 和 MD-2 的细胞 ， 则能在细胞表 面检测 到 MD-2， 扫描共聚焦显微镜显示 MD-2 与 TLR4 共同 定位 J 。MD-2 与TLR4 可能是在细胞 内质网／ 高尔基 体结合 ， 然后到达细胞表面_4 J 。 。 。 MD-2 有 Asn 和 Asn [ ] 两 个 N． 糖 基 化 位 点 。 糖基化在 MD-2 的分泌及与 TLR4 的结合中不起重要 作用。野生 的 MD一 2 和糖基化位 点突变 的 MD． 2 在 TLR4 存在 时细胞表面 的表达水平 以及在有或 无 TLR4 时细胞 培养上清 中的表 达水 平均 无差 别 ， 说 明糖 基 化 并不影响 MD-2 蛋白的折叠_6 J 。但 MD-2 的糖基化却 在 LPS 通 过 TLR4 引起 的 NF-KB 的 活 化 中起 重 要 作 用 。仅表 达 TLR4 和 CD14 的 HEK293 细 胞 对 LPS 刺 激 几乎无 反应 ， 共表 达 MD-2 时 ， LPS 刺激可 引 起 细胞 的强烈活化， 而 MD-2 糖基化位点突变的细胞在 LPS 刺激后 只能引起细胞轻 微的活化 _5 J 。 2 M口 [' 的生物活性 与功能 2． 1 直接 与 LPS ， TLR4 ， TLR2 结合 与 TLR4 胞外区结合。MD-2 通过与 TLR4 结合而定位 于细胞 表面 J 。另有研究 显示 ， 外 源性 MD-2 蛋 白也 能与 TLR4 结合。仅转染 TLR4 的 CHO 细胞 ， 只能在 细胞 表面检测 到 TLR4 ， 而不 能检 测到 MD-2 ； 加入 MD． 2 蛋 白后 ， 在细胞表面不仅能检测到 TLR4 ， 还能检测 到 MD-2 的存 在 。进 一 步说 明 MD-2 通 过 与 TLR4 结 合而共 同定位于细胞表面 TLR4 结合 ， 还能 与 1Z R2 的胞 外 区结合 ， 但 与 TLR2 的 结合弱 于 TLR4 J 。MD-2 蛋 白还 可直接 与 LPS 结合 ， 与 LPS 结合 的部位是 MD-2 的 1 02 —116 位 氨基酸 _9_。 MD-2 抗体可阻断它们之间的结合 ， 而且实验证实 MD． 2 是与 LPS 的脂质 A 结合。MD-2 与 LPS 的解离常数 ( KD) 为 65nm， 与 LPS 和 CD1 4 的亲和力相 近 2． 2 促 进 TLR4 与 LPS 的 结合 MD-2 蛋 白能 。MD-2 蛋 白不但能与 。 仅 表 达 TLR4 。 收稿 日期 ： 2002-12-17 基金项 目： 国家 973 项 目( G1999054203) 作者简介 ： 熊建琼 ( 1970-) ， 女 ． 重庆市人 ， 第三军 医大学野战外科研究所 四室讲 师 ， 主治 医师 ， 博士 ， 从事创 伤的早期 损害及组 织修复 研 究。 修 回 日期 ： 2003-02-27 39 l 维普资讯 http://www.cqvip.com