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    188宝金博页面版: 分子生物学技术在人巨细胞病毒流行病学中的应用

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    内容提示： 中 国 优 生 优 育1 9 9 1 年 第 2卷 第3 期12 7·综 述·分 子 生 物 学 技 术 在 人 巨 细 胞病 毒 流 行 病 学 中 的 应 用北 京 医 科 大 学流 行病 学 教 研室 刘 长 飞 肖 俊近 年来,分 子生物 学技 术 的 长 足发 展,已 使 其 渗透 到 生 命 科 学 的 各 个 领 域。尤 其是分 子 克 隆,核 酸杂交、! 很 制性 内 切 酶 图 语分析 及 多 聚 酶链 反 应 等技术 的 不 断深 入,使 该技 术 不 仅用 于感 染 性疾 病 的诊 断、抗 病毒治疗 效 果 的 观察,而 且也 用 于 某 此 病 毒 的 快 速,特 异 性 检 测。同时促 进 了 传 染 性 疾 病 的 分 子...

    文档格式：PDF | 页数：4 | 浏览次数：23 | 上传日期：2017-01-25 09:39:28 | 文档星级：
    中 国 优 生 优 育1 9 9 1 年 第 2卷 第3 期12 7·综 述·分 子 生 物 学 技 术 在 人 巨 细 胞病 毒 流 行 病 学 中 的 应 用北 京 医 科 大 学流 行病 学 教 研室 刘 长 飞 肖 俊近 年来,分 子生物 学技 术 的 长 足发 展,已 使 其 渗透 到 生 命 科 学 的 各 个 领 域。尤 其是分 子 克 隆,核 酸杂交、! 很 制性 内 切 酶 图 语分析 及 多 聚 酶链 反 应 等技术 的 不 断深 入,使 该技 术 不 仅用 于感 染 性疾 病 的诊 断、抗 病毒治疗 效 果 的 观察,而 且也 用 于 某 此 病 毒 的 快 速,特 异 性 检 测。同时促 进 了 传 染 性 疾 病 的 分 子流 行 病 学 研 究。分 子生 物 学 技 术 解 决 了 许 多经 典 流行 病 学 调 查方 法及血 清 学 方 法所 不 能解 决 的 某 些 问题,如 对造成 某 疾 病 流 行 的 病原 体 在 基 因 水 平 来 分 析其 特征。使 流 行 病 学研 究进 入 分子 水 平。因 该 技 术在 检测方 面 的快 速、特 异、敏 感 等 优 点,现 已 成 为 分 子 流 行病 学研 究 中 的一项 十 分 有价 值 的 工 具。山 于人 巨 细 胞 病毒 ( Huma nC y t on l eg a lo vir u s简 称H C M V )在 优生 优 育 工 作 中具 有重 要的意义,本 文就 分 子生物 学技 术在 其 流行 病学 研 究 中 的应 用 作一介绍。一、几种 主 要 的分子 生 物 学 技 术 方法 及评价1.核酸杂交 ( Nu elei ea ei dh y bri -d iza ti o n):核 酸杂 交 已 为研究微 生 物 的分子 生物学 特 征、某 些 疾 病 的 病 因 创 造 了 条件,也为 流 行病学 的 研 究提供 了 有 用 的 工具,又 为 鉴 定 临 床 标本 中 的 特 异 性 核 酸提供了 手 段,并 广 泛 用 于 HC M V 研 究 的 各个 方面。核 酸 杂交 是 建 立 在碱 基 互 补 的 基 础 上。在 适 当的条件 下,任 何 一 条 单 链都 可 以 根 据碱 基 互 补 的原则 形 成 双股 的D N A分 子。最常 用 的 方 法 是 将 待测 的核 酸固定在硝 酸 纤 维膜 上,用放 射 性 或 非 放 射 性物 质 标 记 I一 IMD N A的 某 一片段 即 为 探 针 ( Pr ob e ),来检 测待 测标 本中 同源 性D N A。从而 作 出 诊断或 鉴定。由 于 采用 的标 记 方 法 不 同,核 酸 杂 交 的特 异 度、灵 敏 度及 同源 性 D N A 的 检 出量也不 同。以 往用 于 核酸 杂 交 的 D N A 探 针 通 常用 同 位素 标 记,它具 有灵 敏 度及 特异 度 高 的优 点。但 山 于 同 位素 的 供 应 受 到 限 制,且 有放 射性 危 害 等 弊端,因 此 使 其 应用 受 到 条件的 限 制。近 年来,生物 索 ( B i ot i n) 标 记 核酸 已 成 为 常 用 的 标 记 方 法。尽 管该 方 法标 记的 探针 检 出 的 同源 性 D N A 的 量 与 放 射性 同位素相 比 稍低,但条 件掌握 好 仍 能 检 出 l op g的 同源 性 D N A 〔` 〕。且 具 有操 作方便,费 用低,所 标 记 的 探 针稳 定 性极高,一 般 可 保 存至 少 一 年 以 上 而 不 影响 其 效果。最近 有人 用地 高 辛 ( D ig o二 i g e nin) 标 记 H C M VD N A的H i n d l l l片段 作为 探 针,检 测 尿 中 的H C M V D N A,并 与 生 物 素 及 ”P 探 针进 行比 较,结果表 明.生物 素标 记的 探 针 可 检 出1 0 ~1 5 p g的同源 D N A,而地 高 辛 与 ” P 标记 的 探 针敏 感 性 一 致,可望部 分 取 代 同 位 素探 针,是 一 种新 型 的非 放 射 性 标 记技 术 〔2 〕。2.限制 性 内 切酶 图 谱分析 ( Ana lysi s0fr e strict io n e ndo n ule a s emap p ing ) :限 制性 内切酶 图 谱 分 析 技 术 已 越 来 越 广 泛的应 用 于 H C M V 的分 子 流 行 病 学 研 究 领 域。其基 本 原理 是:限 制性内 切 酶 是 从 细 菌 中提取出的一 组酶。不 同的 内切 酶对 同 一 种D N A有 不 同 的 切 割 位 点,但 同 一 种内 切 酶 对 同一种 D N A 却有 共 同的 切割位点。它 沿 着 DN A链 上的一 定 位 点 进行切 割,且 每 种 DN链C v A

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