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188宝金博页面版: 依达拉奉联合异丙酚预处理对乳鼠离体脑皮质细胞缺血%2f再灌注损伤保护作用的研究(定稿)

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内容提示: ?2 8 6 ??论著?生lI丝重堑璺塑堕堂。。欤”ぃ〉嗡刻皿希∷芏楸ざ椋臁辏。〈孕停∷埽。。。。。。。。。。 型: 坠: !依达拉奉联合异丙酚预处理对乳鼠离体脑皮质细胞缺血/再灌注损伤保护作用的研究姚娜王迪芬宋曦刘鲜林【摘要】目的观察依达拉奉联合异丙酚预处理对乳鼠离体脑皮质细胞缺血, 冉灌注( I/R )损伤的保护作用以及脑保护效应的n . 1ll,]窗。 方法体外培养出生24h 内sD 乳鼠脑皮质细胞7d , 按随机数字表法分为空白对照组浴氨酸移i伤组、 药物预处理24h 对照组及药物预处理24 、 2、 0h 组。 各药物顶处理组分别丁谷氨酸损伤( 20 0 p m o l/L o . 5 h )前24 、 2、 0 h 用含10 0 斗m o l/1, 依达拉奉和3 m d L 异丙酚的培养基联合预处理原代培养的神经细胞。 通...

文档格式:PDF | 页数:4 | 浏览次数:208 | 上传日期:2013-08-31 07:53:42 | 文档星级:
?2 8 6 ??论著?生lI丝重堑璺塑堕堂。。欤”ぃ〉嗡刻皿希∷芏楸ざ椋臁辏。〈孕停∷埽。。。。。。。。。。 型: 坠: !依达拉奉联合异丙酚预处理对乳鼠离体脑皮质细胞缺血/再灌注损伤保护作用的研究姚娜王迪芬宋曦刘鲜林【摘要】目的观察依达拉奉联合异丙酚预处理对乳鼠离体脑皮质细胞缺血, 冉灌注( I/R )损伤的保护作用以及脑保护效应的n . 1ll,]窗。 方法体外培养出生24h 内sD 乳鼠脑皮质细胞7d , 按随机数字表法分为空白对照组浴氨酸移i伤组、 药物预处理24h 对照组及药物预处理24 、 2、 0h 组。 各药物顶处理组分别丁谷氨酸损伤( 20 0 p m o l/L o . 5 h )前24 、 2、 0 h 用含10 0 斗m o l/1, 依达拉奉和3 m d L 异丙酚的培养基联合预处理原代培养的神经细胞。 通过测定神经细胞存活率( p q 甲基偶氮唑盐( M 7 丌)比色法]、 乳酸脱氧酶( L D H )漏出率、 神经细胞N a + - K + _ A T P 酶活性观察神经细胞成活和细胞损伤情况; 通过测定超氧化物歧化酶( S O D )活性( 黄嘌呤氧化酶法)、 丙二醛( M I)A )含最( 硫代巴比妥酸法)观察神经细胞抗氧化和氧化水平; 流式细胞仪检测冲经细胞凋亡情况。 结果与空白对照组比较。 谷氮酸损伤组神经细胞存活率[ ( 62. 24 - 23. 4 )%比( 9 0. 54 - 14 . 8)%]、 S O D 活性( U /m l: 6. 8644- 2. 87 2比29. 5694- 3. 684)、 N a + - K + - A "IT 酶活性( U ?m 91?h ^0. 3184- 0. 146比0. 6364- 0. 168)均显著下降。 神经细胞凋亡牢[ ( 9. 4±0. 7 )%比( 6. 1±0. 2)%]、 M D A 含量( n m n l/m l: 0. 515±0. 101比0. 294 4 - 0 . 10 5)、 L D H漏出率[ ( 4 1. 2±1. 6)%比( 36. 8±4 . 6)%]均显著升高( P < 0. 05或P < 0. 0I)。 与谷氨酸损伤组比较。 药物预处理组细胞存活率、 S O D 活性、 N a L K L A T P 酶活性均显著升高。 细胞凋亡牢、 M D A 含量、 L D H 漏出率均最著下降, 并呈S 于Ih I依赖性, 以预处理24 h 组作用最为显著[ 细胞存活牢: ( 8 9 . 2± 30 . 3)%比( 62. 2± 23. 4 )%, S O D 活性( U /m 1): 17 . 7 80±4. 514比6. 864±2. 87 2, N a L K + - A T P 酶活性( U ?m g 。 ‘?h 。 ): 0. 541±0. 052比0. 3184- 0. 146, 细胞凋亡率: ( 6. 7±0. 4)%比( 9. 44- 0. 7 )%, M D A 含量( n m o ]/m 1): 0. 319 4- 0. 101比0. 515士0. 101, L D H 漏出牢: ( 37 . 24-1. 4 )%比( 4 1. 24 - 1. 6)%, 均P < O . 0 1]。 结论依达拉奉联合异丙酚预处理对乳鼠离体脑皮质细胞I/R 损伤有明显协同保护作用; 且以24h 作为时问窗的脑保护作用最明显。【关键词】 依达拉奉; 异丙酚;预处理;腑皮质细胞;缺血/再灌注损伤, 脑;谷氨酸;凋亡N e u r o p r o te c tiv ee f f e c ts o f c o m b in e dp r e tr e a tm e n t w ith e d a r a v o n e a n dp r o p o f o l o n n e n H a ta l r a t c e r e b r a lc o r tic a l n e u r o n s w ithisc h e m ia /r e p e r f tm io n in ju ryin v itr oY A ON a * 。 W A N G D i—f e n 。 S O N GX i, I_ 1UX ia n —lin .’ D e p a r tm e n to f A n e sth e sio lo g y 。 L u o y a n gO r th o p e d ic - T r a u m a to lo g ie a lH o sp it',d . L u o y a n g4 7 10 0 2 , H e n a n , C h in aC o r r e sp o n d in ga u th o r : W A N cD i—昏11. D e p a r tm e n to fIn te n siv e C a r e U n it. th e A m lia te dH o sp ita lo fG ll|v a n gM e d ic a l0 , JJ哩e, G u iy a n 9 550 0 0 4 , G u & h o u , C h in n , E m a il: d f w a n 9 6@ 阳^f Jf 】 . eo m . cn【A bstra ct 10bjectiv eT oin v e stig a teth ep r o tectiv eef f ect o fc o m b in e dp m tr e a tm e n to f e d a r a v o n ea n dpro /x )f i)lo ilcerebra l C 0 1. teXw ithist?h em id reperf u sio n( I/R )inju rya n ditsth e r a p e u ticw in d o w . M e th o d sS p r a g a mD a w le y ( S D )r a t b r a inc o r te x cells h a r v e ste dw ith in 24 h o u r so fbirth w e r e cu ltu r e( 1 ifl v itro f o r 7d a y s. T h ecellsw e r e th e n d iv i( 1ed in tob la n k c o n tr o lg r o u p , g lu ta m a te injury g r o u p , 2 4 - h o u r d r a g p r e c o n d itio nc o n tr o lg r o u p , a n d2 4 - , 2 - , O - h o u rd r u gp r e c o n d itio n g r o u p s a c c o r d in gto r a n d o m n u m b e r ta l)le. T h e n e r v e ceils in ea t’ hp m tr e a tm e n t g r o u pw e r e eu ltu r M inm e d iu mc o n ta in in g10 0Ix m a I/Lo f e d a r a v o n e a n d 3m d Lo fp r o p n f i)l2 4 , 2 , o r0 h o u rb e f o r e ,g lu ta m a te d a m a g e( 20 0 “m n l几^)r0. 5 h o u r ). N P w eeell sn r v iv a l o rd a m a g ew a s d e te r m in e db y m e th y l th ia z o ly I tetr a z o liu m ( M T T ),k ( ?ta led e h y d r o g e n a se ( L D H )le a k a g er a te . a n dn P r v e cell N a * - K + - A T P a sea ctiv ity . T h eo x id a tio na ll( 1 a n ti—o x id a tio na b ility o f n e r v e cells w a s o b se r v e d b y d e te r m in in g su p e r o x id e d ism u ta . se( S O D )a ( ?tiv ity( x a n th in e ox id a . se),m a ln n d ia M e h y d e ( M D A )e o n te n t( th io b a r b itu r ie a cid ). N er v ea p o p to sisw a sd e te c te db yf la w c y to m e tr y . R e su ltsC o m p a r e d w ith b la n kco n tr o lg r o u p , inth eg lu ta m a te inju ryg r o u p , n el'l/ecell su r v iv a lra te【( 62. 2士23. 4)%v s. ( 9 0 . 5 4- 14. 8)%], th ea ( ?tivityo fS O D ( U /m l: 6. 8 64 士2. 8 7 2 v s. 29 . 56 94 - 3. 6 8 4 ), N a + 一K * - A T P a sem ?tivity( U ?m g - I. h ~: 0. 318±0. 14 6v s. 0 . 6364 - 0. 168)w ere. sig n if ica n tly ( 1∽rea se( 1。 a n dr a te o fn e u r o n a la p o p to sis【( 9 . 44-O . 7 )%v ,q . ( 6. 1 4- 0. 2)%], th ec o n te n t o fM D A ( n m o l/m h0 . 515 4 - 0 . 10 l v s. 0 . 29 4 ± 0 . 10 5)。 L D Hlea k a g er a te[ ( 41. 2±1. 6)%v s. ( 36. 8±4. 6)%】 w eresig n if i( ?a n tlyin eretr,‘ed ( P < 0 . 0 5 o rP < 0 . 0 1). C o m p a r e dw ithg lu ta m a tein ju ryg r o u p . th ecell su r v iv a l r a te a n dth ea rtiv ityo fS O Da n dN a + - K * - A T P mw e r esig n if i( ?a n tlyin c r e a se dinth ed r a gp r e tr e a tm e n t g r o u p s, a n d a p o p to sisla t e . M D Ac o n te n t, a n dL D Hle a k a g e r a te w e r e sig n if ica n tlyd e c r e m se d w ithtim e —d e p a r tm e n t。 a n de雎ct in th e24 一h o u rp r e tr e a tm e n t g r o u pw a sm o stsig nifi( ?a nt[ su rviva lr a te o feell: ( 8 9 . 24-30 . 3)%v s. ( 6 2. 24 - 23. 4 )%. S O D a etiv ity ( U /m 1): 17 . 7 8 0 士4 . 514 v s. 6. 864±2. 87 2。 N a + 一K + - A T P a se a ctiv ity( U - m g - 1?h 4 ): 0 . 54 14 - 0 . 0 52v s. 0 . 318 土0 . 14 6 , th er a teo f eelIa p 01)to sis: ( 6. 74 - 0 . 4 )%v s. ( 9 . 4 ± 0 . 7 )%, thc o n te n t0f M D A ( n m n U m I): 0 . 319 ± 0 . 10 l v s. 0 . 5154 - 0 . 10 1. L D H le a k a g e ra te: ( 37 . 24 - 1. 4 )%v s. ( 4 1. 2 4- 1. 6)%, a lI万方数据

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