188宝金博页面版

收稿日期: ２０２５Ｇ０６Ｇ１１作者简介:王承红( １９８２－ ),女,硕士,主治医生,主要从事放射治疗学的相关研究通信作者:王承红( EＧmail : wangchengh２０２３＠１６３．com )组蛋白 H３K１８ 乳酸化通过 HIFＧ１α 调控肺癌细胞生长及肿瘤组织中 T 细胞浸润王承红,田曼霖(聊城市第二人民医院 　 肿瘤放疗科,聊城 。玻担玻叮埃 )摘要:为探究抑制组蛋白 H３K１８ 乳酸化( H３K１８lactylation , H３K１８la )在肺癌中的影响,免疫组织化学( immunohistochemＧistry , IHC )测定 ５６ 对肺癌组织和癌旁组织中H３K１８la 水平.采用糖酵解抑制剂 ２Ｇ 脱氧 Ｇ D Ｇ 葡萄糖( ２ＧdeoxyＧ D Ｇglucose ,２ＧDG )降低 H３K１８la 水平,小鼠 Lewis 肺癌细胞( Lewislungcarcinoma , LLC )分为对照组、 ５mmol / L２ＧDG 组、 １０mmol / L２ＧDG 组和 １０mmol / L２ＧDG ＋ pcDNA３． １Ｇ 缺氧诱导因子 １α ( hypoxiaＧinduciblefactorＧ１α , HIFＧ１α )组. ５Ｇ 乙炔基 Ｇ２＇Ｇ 脱氧尿苷(５ＧethynylＧ２＇Ｇdeoxyuridine , EdU )法测定细胞增殖水平,克隆形成试验测定细胞克隆形成数量.转录组测序分析对照组和１０mmol / L２ＧDG 组细胞中的差异表达基因,并进行京都基因和基因组数据库( Kyotoencyclopediaofgenesandgenomes ,KEGG )富集.染色质免疫共沉淀定量 PCR ( chromatinimmunoprecipitationquantitativePCR , ChIPＧqPCR )验证 H３K１８la 与HIFＧ１α 启动子结合. C５７BL / ６ 小鼠接种 LLC 细胞构建移植瘤模型,分为模型组、 １００mg / kg２ＧDG 组、 ２００mg / kg２ＧDG 组和 ２００mg / kg２ＧDG ＋ pcDNA３．１ＧHIFＧ１α 组.免疫荧光染色法测定肿瘤组织中 CD８＋ T 细胞浸润率. Westernblotting 测定H３K１８la 、 HIFＧ１α 和 PDＧL１ 表达水平. ELISA 测定肿瘤组织颗粒酶 B 、 TNFＧα 和穿孔素水平.与癌旁组织比较,肺癌组织H３K１８la 水平升高.与对照组比较, ２ＧDG 组 LLC 细胞增殖和克隆形成能力, H３K１８la 、 HIFＧ１α 和 PDＧL１ 水平, H３K１８la 在HIFＧ１α 启动子上的富集显著降低;与 １０mmol / L２ＧDG 组比较, １０mmol / L２ＧDG ＋ pcDNA３． １ＧHIFＧ１α 组细胞增殖水平和克隆形成能力恢复, HIFＧ１α 和 PDＧL１ 表达水平显著升高(P ＜０． ０１ ).与模型组比较, ２ＧDG 组肿瘤体积减少, CD８＋T 细胞浸润率增加,颗粒酶 B 、 TNFＧα 和穿孔素浓度增加, H３K１８la 、 HIFＧ１α 和 PDＧL１ 水平显著降低;与 ２００mg / kg２ＧDG 组比较,２００mg / kg２ＧDG ＋pcDNA３．１ＧHIFＧ１α 组肿瘤体积增加, CD８＋T 细胞浸润减少,杀伤因子浓度降低, HIFＧ１α 和 PDＧL１ 水平显著上调( P ＜０．０１ ).以上结果说明干预 H３K１８la 水平可抑制肺癌细胞生长,增加肿瘤组织中 T 细胞浸润,其机制可能与阻断 HIFＧ１α / PDＧL１ 通路有关.关键词:肺癌;乳酸化修饰; T 细胞; H３K１８ 乳酸化;缺氧诱导因子 １α ;程序性死亡受体 Ｇ 配体 １中图分类号: R７３４．２　　　　　 文献标志码: A　　　　　 文章编号: １００１Ｇ２４７８ ( ２０２６ ) ０４Ｇ０５０６Ｇ１０　　 在缺氧环境下,肿瘤细胞通过 Warburg 效应产生大量乳酸,诱导组蛋白乳酸化修饰重塑细胞转录组 [１ ] .组蛋白乳酸化修饰作为一种代谢相关翻译后修饰,通过将乳酸共价结合到组蛋白赖氨酸残基上,直接连接细胞代谢状态与基因表达调控,成为肿瘤研究领域的前沿热点 [２Ｇ３ ] .组蛋白H３K１８ 乳酸化( H３K１８lactylation , H３K１８１a )已被证实在多种癌症中异常激活,可通过影响染色质结构和转录因子活性参与肿瘤进展 [４Ｇ６ ] .表达于肿瘤细胞的PDＧL１ 是介导肿瘤免疫逃逸的关键分子. PDＧL１ 与其受体 PDＧ１ (主要表达在活化 T 细胞表面)结合后,抑制 T 细胞的增殖、杀伤因子(如 IFNＧγ , TNFＧα )的产生和细胞毒性,导致 T 细胞耗竭甚至凋亡.缺氧诱导因子 １α ( hypoxiaＧinduciblefactorＧ１α , HIFＧ１α )作为肿瘤细胞应对低氧环境的核心转录因子,其异常激活可促进血管生成、糖酵解及通过上调PDＧL１ 表达介导免疫逃逸[ ７ ] .近年研究发现HIFＧ１α 是表观遗传修饰的靶标之一,例如乙酰化修饰可影响 HIFＧ１α 蛋 白 稳 定 性 和 转 录 活 性 [８ ] .然 而,H３K１８la 是否通过调控 HIFＧ１α 表达,参与肿瘤微环境中免疫细胞浸润的调控,目前尚不清楚.本研究旨在揭示 H３K１８la 对 HIFＧ１α 表达的调控作用,及其对肺癌细胞生长和 T 细胞浸润的影响.１　 材料与方法１． １　 材料１． １． １　 主要试剂与仪器 　 小鼠 Lewis 肺癌( Lewislungcarcinoma , LLC )细胞株( ＃TCMＧC７４２ )购自苏州海星生物有限公司; ２４ 只无特定病原体级雄?６ ０ ５?现代免疫学 ２０２６ 年 ７ 月第 ４６ 卷第 ４ 期CurrentImmunologyVol． ４６No． ４Jul．２０２６