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188宝金博页面版: AVP恢复缺氧血管平滑肌细胞反应性与V1aV2受体的关系及其非钙依赖性调节机制

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内容提示: 第七届全国创伤学术会议暨20 0 9 年海峡两岸创伤医学论坛7 thN a tio n a lC o n g r e sso nT r a u m aM a in la n da n dT a iw a nF o r u mo nT r a u m a2 0 0 9节途径。 我们前期研究也发现P K C 在休克后血管反应性和钙敏感性调节中具有重要作用, 那么在严重创伤/4 * 克后, P K C . £ 是否参与了A V P 恢复血管反应性和钙敏感性的作用?目前尚未见相关报道。 本实验采用大鼠失血性休克模型和缺氧损伤体外培养血管平滑肌细胞模型, 分别从离体器官和细胞水平探讨了P K C . e亚型在A V P 恢复休克大鼠血管反应性和钙敏感性中的作用, 为今后更好的应用A V P 抗休克提供更多的实验依据。 实验方法: 利用离体血管环张力测定技术, 观察P K C - e抑制剂对A V P 调...

文档格式:PDF | 页数:1 | 浏览次数:20 | 上传日期:2014-09-24 18:01:44 | 文档星级:
第七届全国创伤学术会议暨20 0 9 年海峡两岸创伤医学论坛7 thN a tio n a lC o n g r e sso nT r a u m aM a in la n da n dT a iw a nF o r u mo nT r a u m a2 0 0 9节途径。 我们前期研究也发现P K C 在休克后血管反应性和钙敏感性调节中具有重要作用, 那么在严重创伤/4 * 克后, P K C . £ 是否参与了A V P 恢复血管反应性和钙敏感性的作用?目前尚未见相关报道。 本实验采用大鼠失血性休克模型和缺氧损伤体外培养血管平滑肌细胞模型, 分别从离体器官和细胞水平探讨了P K C . e亚型在A V P 恢复休克大鼠血管反应性和钙敏感性中的作用, 为今后更好的应用A V P 抗休克提供更多的实验依据。 实验方法: 利用离体血管环张力测定技术, 观察P K C - e抑制剂对A V P 调节失血性休克大鼠肠系膜上动脉( S M A )血管反应性和钙敏感性的作用; 利用缺氧损伤的双室培养血管平滑肌细胞模型, 观察P K C . £ 亚型在A V P 调节缺氧V S M C 收缩反应性中的作用。 结果显示: A V P ( 5× 10 . i0m o l/L )可显著升高失血性休克大鼠血管环对去甲肾上腺素( N E )的反应性和钙敏感性, 使N E 和C a 2+ 的量. 效曲线明显左移, E m a x 升高( P < 0 . 0 1), 而特异性的P K C —e。 亚型抑制剂( 10. 5 m o l/L )可明显的拮抗A V P 的作用; 在以缺氧处理的双室培养V S M C 的反应性来模拟休克血管状态的实验中, P K C . e抑制剂也显示了对A V P 诱导缺氧V S M C 收缩反应升高的拮抗作用。 结果提示P K C . e亚型参与了A V P 改善休克后血管反应性的作用, 并可能通过钙敏感性调节途径来发挥作用, 但其具体调控分子以及A V P 通过何途径来激活P K C —e尚需进一步研究阐明。A V P 恢复缺氧血管平滑肌细胞反应性与V la /V 2受体的关系及其非钙依赖性调节机制杨光明李涛徐竞刘良明第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所, 创伤、 烧伤与复合伤国家重点实验室( 重庆4 0 0 0 4 2)精氨酸血管加压素( A V P )因其明显的抗利尿作用被而用于治疗尿崩症已超过半个世纪, 而它的心血管作用直到近来才引起人们的注意。 国内外研究显示, A V P 对多种休克具有较好的治疗效果, 我们也发现A V P 对休克后血管反应性降低有较好的恢复作用, 其V ia 和V 2受体可能参与了这一过程。但是严重创伤/休克后, 血管反应性降低, 而血管平滑肌细胞( V S M C )内C a 2+ 浓度并未降低, 反而有所升高、 甚至出现钙超载, 在此情况下, A V P 通过V ia 受体增加胞内C a 2+ 浓度来促进血管收缩的经典途径不能解释A V t; 能有效恢复血管反应性的作用。 因此, 我们利用缺氧处理双室培养血管平滑肌细胞模型来模拟休克后血管平滑肌低反应性状态, 进一步观察了A V P 对缺氧V S M C 收缩反应性的影响及其V la /V 2受体在其中的作用, 以及V S M C 肌球蛋白轻链激酶( M L C K )和肌球蛋白轻链磷酸酶( M L C P )活性的变化, 同时观察了V la /V 2受体在A V P 调节休克大鼠肠系膜上动脉( S M A )血管平滑肌肌球蛋白轻链( M L C 20 )磷酸化水平中的作用, 探讨A V P 是否通过其受体介导的非钙依赖性/钙敏感性调节途径来增强休克后血管反应性。 实验方法: 利用缺氧处理双室培养V S M C 模型和大鼠失血性休克模型, 观察V la /V 2受体在A V P 调节缺氧V S M C 收缩反应性中的作用, 同时检测V S M C 肌球蛋白轻链激酶( M L C K )和肌球蛋白轻链磷酸酶( M L C P )活性、 休克大鼠肠系膜上动脉血管M L C 20 磷酸化水平的变化。 结果显示: 缺氧损伤使V S M C 对去甲肾上腺素( N E )的反应性明显降低, M L C P 活性明显升高, M L C K 活性明显降低, 同时休克血管M L C 20 磷酸化水平降低; A V P处理可恢复缺氧V S M C 的收缩反应性、 降低缺氧V S M CM L C P 活性、 升高休克血管M L C 20 磷酸化水平。 V la 受体拮抗剂预处理可明显拮抗A V P 的上述作用, 而V 2受体拮抗剂无明显作用。结果提示A V P 通过V la 受体改善了休克血管和缺氧V S M C 的反应性, 其机制主要是通过血管平滑肌收缩的钙敏感性调节途径( 抑制M L C P 活性), 而不是通过传统的V la 受体介导的钙依赖途径。

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