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188宝金博页面版: 粪便大肠癌脱落细胞形态学观察,DNA定量及p53蛋白表达的初步研究

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内容提示: 谚 钗 { 彳 咯 J 7 ; 乏 ④ 中 华 消 化 杂志 200 0 年 8 月 第 20 卷 第 4 甥( 善 2 7。 粪便大肠癌 脱 落细胞形态学观察 、 DNA 定量及 p53 蛋 白 表 达 自 勺 初 步 研 究 6 李世 昊 霞 武子 涛晨 智敏 ·论著摘要· ·; 。 一 范如 其大肠癌是人娄 常见 恶性肿 瘤之~ , 结直 肠上皮 细胞更新 很快 . 成 人每天有将 近 10 结肠 上皮细胞脱落 = 粪便 中结 直肠脱落细胞如 同一个 窗口反映 r 肠牯膜上 皮的增生状 况。 我们针对脱落细胞的提取及检测进 行初步研究 , 以 解其在 夫肠癌诊 断及啼查 中的作用 。 材料和方涪 一、一般 资料 收 ^...

文档格式:PDF | 页数:2 | 浏览次数:129 | 上传日期:2015-05-10 12:09:12 | 文档星级:
谚 钗 { 彳 咯 J 7 ; 乏 ④ 中 华 消 化 杂志 200 0 年 8 月 第 20 卷 第 4 甥( 善 2 7。 粪便大肠癌 脱 落细胞形态学观察 、 DNA 定量及 p53 蛋 白 表 达 自 勺 初 步 研 究 6 李世 昊 霞 武子 涛晨 智敏 ·论著摘要· ·; 。 一 范如 其大肠癌是人娄 常见 恶性肿 瘤之~ , 结直 肠上皮 细胞更新 很快 . 成 人每天有将 近 10 结肠 上皮细胞脱落 = 粪便 中结 直肠脱落细胞如 同一个 窗口反映 r 肠牯膜上 皮的增生状 况。 我们针对脱落细胞的提取及检测进 行初步研究 , 以 解其在 夫肠癌诊 断及啼查 中的作用 。 材料和方涪 一、一般 资料 收 ^ 我院结直 肠癌 患者 l l 例 . 均 经肠镜 活检证 实 为腺 癌 。其中男 5 倒 ; 女 6 例 ; 年 龄分布 36~75 岁 , 平均 59 8 岁。 组织分 化 : 高分 化腺 癌 6 例; 中分化腺癌 4 例 ; 低 分化腺癌 1 例 Dukes 分期 : B 期 6 例 ; D 期 1 例 4 侧因未 进行 手术 而 具体 分期 不详 。 二 、 粪便 中脱落细胞提取 采集新鲜成 形粪便 3 ~5 g 或 50 ~100 g 稀水样 便, 加 ^ ME M 营养液【 ( 另含 P N 500 u / L , SM 500 mg/ I , 二性霉 素 B 1 25 mg/ L , 庆大霉素 5O mg/ L . 去脂 BSA t0g/ L , N 乙酰半 胱氮酸 5 mmol/ L ) 50 ~t00 ml 充分 混匀 ; 依 次经 过 30 、 100 、 200 和 300 目筛网过滤 ; 将 滤液“l 500 转 / r a in 离心 10 rnln ~ 取 沉淀溶片 , 95 %乙醇 固定 10 r a in; 常规 HE 染色 , 普通光 镜 下 观 察 。 三 、 DNA 含量测定 研究对象为 5 例 大肠癌 患 者 , 其 中高 分化腺 癌 1 侧 ; 中 分化腺癌 3 倒 ; 低分 化牌癌 1 例 胞( 包括肯定 的癌 细胞 、 可 疑癌 细胞 及重度异 型增 生细 胞) 脱落细胞片进行常规 Feulgen 染色 , 光铙下 400 倍 摄取 图像 , 经 H E 染 色均检 出异 型细 经计 算机图像分析 系 统分 析统 计 , 计算 所 飘 I定 细胞 的 DNA 含量 。每例患者在 同一 张橡片测定 20 十 淋 巴细胞 为标 准对 照 , 光镜 下观察到 的异型 细胞 作为分 析细胞 进行 飘 I定 . 每 例测量分析细脆 的数 量为 10 ~25 个 。采用 的图像分 析仪为 同济 医科大学千屏工程公 司研制 的 H P IAS -1000 彩色病理 图 文分析系 统 四 、 p53 蛋 白 表 达 以上 述 l 1 例大肠癌患者 中的 6 例 患者 为研 究对象 , HE 染色证实脱落细 胞中含有异型细胞 。采用 SP 法对脱落细 胞 及同一 患者的蛆织 石蜡 切片( 厚 5 Ⅲ ) 进 行 p53 蛋 白的表 达 的检测 。所用 p53 单抗 及 s P 试 剂盘均购 自迈新公司 在 加 I 抗前 标率于 DH : 6 0 , 0 0 1 t o ol/ L 的枸橼 酸缓 冲液 中行 微 作者单位: 100700北京 军K 总 医院捎化内科C范如 I英 、 李世荣 武子涛 、 晨智敏) , 北京 军区 总医院病理科 (吴霞) 波修复 抗 原 实 验 设 阳性 对 照, PBS 取 代 I 抗 作 为 阴 性 对 照 。 p53 蛋 白阳性表 达判 断标 准: p53 蛋 白表达 阳性 细胞 有 棕黄色颗粒或斑块分布干胞校 内, 阳性染色肿瘤 细胞数 目大 于 10 %时 . 判为 p53 染 色阳性 , 即过 表达。小 于 10 %判为 阴 性 五 、 统 计 学 处理 采用 检验 P 值小于 0 I ] 5 为差异有 显著性c 结 果 一、HE 染片 中结直肠癌脱落细胞 的检测 l 1 例大肠癌 患者 粪便 中提取 的脱落细 胞进 行 }讴 染 色 后 . 经一位脱 落细胞学病 理 医师阅 片 胞 , 其中 4 倒 为癌; 1 倒 为可 疑癌 ; 2 倒检 出 异型 增生细 胞。 7 倒患者 捡出 阳性细 敏感性 达63 6 %( 7/ 11) 脱落瘟细胞形态 学特征 : 瘟细胞 可 以单十 脱落 . 但大 多 以细胞 匝形式脱 落 瘟细 胞体积 大, 核 浆 比例失调 . 棱大浓染 , 染色质 呈斑 块状分布不均 , 有 的癌 细 胞 古有多棱 , 有 的瘟细胞浆 内吉有粘 }疰空泡 , 将 校挤 向一侧 , 呈印戒状。 同一群癌 细胞大小 不等 , 形态不 一 ( 见图 1) 。不 典 型增生 : 细胞较 正常细 胞体 积增大, 染色质 增粗 , 核深染 。 但异型性程 度不 及癌细胞 , 但不能完全排 除不典型癌细 胞的 可 能性。可疑瘟 : 涂片中有 异型细胞 , 基率符台瘟细胞 标准, 但 由于数量太少不能完全肯定为癌。 誊 ◆, ● ▲ ’ . 圈 1粪便中脱落癌细胞群( HE × 400) 二 、 DNA 含 量 分析 5 倒大脑癌患者粪便中脱 落细胞 D NA 含量 经图像分析 仪分 析 , 直方图显示各例均属异倍体 , 5 例患者共检测 103 个 细胞 , DNA 均值为 27 59pg , 显著 大于 2 倍体 DNA 含 量基准 值 7 1 8pg。其中高、 中及低分化腺癌 DNA 含量见表 1。 维普资讯 http://www.cqvip.com

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