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棉花学报 Cotton Sci ence 2014，26( 1) ：10～17 棉花黄萎病生防芽孢杆菌Z．5菌株发酵培养基的优化 张冬冬，姜军坡，朱宝成+ ( 河北农业大学生命科学学院，河北保定071001) 摘要：在农用微生物菌剂中芽孢杆菌菌剂产品多采用芽孢作为有效成分，因此产芽孢条件的优化对棉花黄萎 病生防细菌的工业生产有着重要意义。本文通过单因素试验分析了8种碳源、8种氮源和6种无机盐对 Bac讲usmaJ acj fens如Z．5菌株芽孢产量的影响，采用P1acke似Buman试验设计确定了影响芽孢产量的主要因 素，用最陡爬坡路径逼近最大响应区域，利用Box—Behnken试验设计及响应面分析法确定主要影响因素的最 佳条件。结果表明，单因素试验筛选出3种碳源( 玉米粉、麸皮、葡萄糖) 、3种氮源( 豆饼粉、花生饼粉、酵母粉) 和2种无机盐(MnS0。· H20、CaCl 2)；P1ackett—Buman试验确定Z．5菌株生产芽孢最适碳源、无机盐和氮源分别 为玉米粉、MnS0。· H：O和豆饼粉，最陡爬坡路径法获得此3种因子的最适浓度范围为：玉米粉1．0％～2．0％、 MnS04· H20 0．05％～0．09％、豆饼粉为1．0％～2．0％。响应面法得到芽孢产量与玉米粉、MnS0。· H：0和豆饼粉含 量的回归方程。最终确定优化培养基组合为玉米粉1．66％、豆饼粉1．30％、MnS04· H20 0．07％、NaH2P04· 2H20 0．2％、Na2HP04· 2H20 0．4％，优化后芽孢产量达到1．97× 109mL～，与理论值基本相符。 关键词：响应面法；棉花黄萎。簧锓乐危谎挎吒司环⒔ 中图分类号：S435．621 文献标志码：A 文章编号：1002．7807(2014)01—0010—08 Opti mi zati on0f Fermentati on Condi ti ons Of a Bi ocontrol BaCtenal l sol ate Bacj ：『『us Z一5 agai nSt ConOn Verti Ci |l i um W．|t Z11ang Don酣ong，J i ang J u印o，Zhu Baocheng’ (C0Ⅱege ofL愉sdence，Ag咖uJ 姐aJ 踟慨rs匆ofHe6西Baod坞Hebd 07100l ，口如a) Abs缸∞t：Thesporewasusual l yused as me acti vei n铲edi entfor most Bac埘usproductsi na蛳cul tIl ml mi croo瞎ani smprepam— ti on，so叩ti mi zati on of spores produci ng condi ti ons of Ba删us埘a肠ci fens如Z一5，a bi ocon们l bacteri al i sol ateagai nst cotton Veni ci l l i 嗽wi l t，was ofgreat si gni 乱ancei n i ndu嘶alproducti on．Thee恐cts ofei ghtki nds of carbonsources，ei ghtki nds of ni 们gensoWces aIl d si xi no玛ani csal ts on theyi el d of sporesproducedbyBa删us m幽cj 劬协z一5 werestudi edby si ngl efac— toranal ysi si n order to gai n the opti mumcarbon，ni 仃Dgen and i no唱ani c sal t．Pl ackett—Buman(PB)eXperi mental desi gIlwas used to detem】i ne me mai n factorsafrec曲g sporc producti on．The passofste印estascent was undcrtakento印pmachmeopti — mal response regi onof the threesi 弘i fi cantfactors．Box—BehIl l ( endesi 印and responsesu由ceanal ysi sweread叩tedto觚her i nvesti gateme mutual i nteracti on between the vari abl es andi denti 每opti mal val ues thatb—ngmaXi m砌spore yi el d．The resul t showed mat comnol l r，branand91ucosewere the three most sui tabl e carbon sourcesaccordi ngto si ngl e factori al experi mems， whi l esoybean meal ，peanutmeal andyeastwere廿l e t11ree bestni 廿ogen sources，a11d Mns04· H20andcacl 2were the best i no卜 gani csan．n’ s al so showed i n PBdes咖matcomnour，Mns04· H20and soybeanmeal were meopti mumcarbon sources，i nor_ gani csal t andni 仃I) gen sources，respecti Vel y．The pathofsteepestascemexperi memwaseInpl oyedto印proach me叩ti mal re- gi onofthe medi umconcen仃ati on of comnour 1．0％-2．O％，MnS04· H200．05％一0．09％andsoybeanmeal 1．0％-2．0％．The re— gressi on equati onbetween mespore producti onof Bac讲us埘a肠cf￡ens商Z一5 and me V撕abl es尔) mcarbonsource，i no玛ani csal t andni ‰gensources contentbytheresponsesurface method werecomputed．Thefi nalopti malcul turc medj umwas as f01l owed： comfl our 1．66％，soybeanmeal 1_30％，MnS04‘ H20 0．07％，NaH2P04‘ 2H20 0．2％，Na2HP04· 2H200．4％．Thespore)ri el d 收稿日期：2013．09—25 作者简介：张冬冬(1981一)，男，在读博士，讲师，zhangdongcumt@163．com；+通讯作者，朱宝成，曲u2222@126．com 基金项目：保定市科学研究与发展计划项目( 10zC004) ；河北省自然科学基金项目( C2014204027) 万方数据