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    188宝金博页面版: 云南省犬细小病毒 VP2基因检测分析

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    内容提示： 动物医学进展 ， ２０１５ ， ３６（１） ： ６６‐７０Progress in Veterinary Medicine云南省犬细小病毒 VP２ 基因检测分析　 收稿日期 ： ２０１４‐０９‐２８　 基金项目 ： 云南省公益性关键技术研究开发计划子项目（２０１３CH００１）　 作者简介 ： 郑龙龙（１９８８ － ） ， 男 ， 山西运城人 ， 硕士研究生 ， 主要从事动物传染病学与分子流行病学研究 。 倡 通讯作者郑龙龙１， 朱玲云１， 宋春莲１， 高利波１， 毕峻龙２， 徐 　 英３ 倡（１ ． 云南农业大学动物科学技术学院 ， 云南昆明 ６５０２０１ ； ２ ． 楚雄州动物疫病预防控制中心 ， 云南楚雄 ６７５０００ ；３ ． 云南农业职业技术学院 ， 云南昆明 ６５００３１ ）　 　 摘 　 要 ： 为了解云南省犬细小病毒 VP２ 基因分子流行变异情况 ， 对来源于云南省 ７ 个地级市 １３ ...

    文档格式：PDF | 页数：6 | 浏览次数：12 | 上传日期：2015-04-07 08:55:49 | 文档星级：
    动物医学进展 ， ２０１５ ， ３６（１） ： ６６‐７０Progress in Veterinary Medicine云南省犬细小病毒 VP２ 基因检测分析　 收稿日期 ： ２０１４‐０９‐２８　 基金项目 ： 云南省公益性关键技术研究开发计划子项目（２０１３CH００１）　 作者简介 ： 郑龙龙（１９８８ － ） ， 男 ， 山西运城人 ， 硕士研究生 ， 主要从事动物传染病学与分子流行病学研究 。 倡 通讯作者郑龙龙１， 朱玲云１， 宋春莲１， 高利波１， 毕峻龙２， 徐 　 英３ 倡（１ ． 云南农业大学动物科学技术学院 ， 云南昆明 ６５０２０１ ； ２ ． 楚雄州动物疫病预防控制中心 ， 云南楚雄 ６７５０００ ；３ ． 云南农业职业技术学院 ， 云南昆明 ６５００３１ ）　 　 摘 　 要 ： 为了解云南省犬细小病毒 VP２ 基因分子流行变异情况 ， 对来源于云南省 ７ 个地级市 １３ 个犬细小病毒样品进行了 VP２ 基因的扩增和序列分析 ， 并与相关参考序列进行了遗传进化比对分析 。 结果表明 ，１３ 个样品中 ９ 个基因型为 CPV‐２a ， ３ 个基因型为 CPV‐２b ， １ 个基因型为 CPV‐２ 。 氨基酸序列变异主要集中在 ２９７ 位 ～ ５１８ 位氨基酸处 ， 其中 ３２４ 位和 ４４０ 位氨基酸变异在犬细小病毒进化过程中扮演着重要角色 。遗传进化分析显示 １０ 个样品序列形成了一个相对于国内外参考序列独立的遗传进化分支 ， 提示云南省犬细小病毒以 CPV‐２a 基因型流行为主 。　 　 关键词 ： 犬细小病毒 ； VP２ 基因 ； 基因型 ； 遗传进化中图分类号 ： S８５２ ． ６５９ ． ２文献标识码 ： A文章编号 ： １００７‐５０３８（２０１５）０１‐００６６‐０５　 　 犬细小病毒病 （Canine parvovirus disease ，CPVD）是由犬细小病毒 （Canine parvovirus dis‐ease ， CPV）引起的一种急性 、 烈性传染病 ， 是当前对犬类：ψ畲蟮拇静≈ 。 该病能够引起犬类白细胞减少 、 剧烈呕吐 、 出血性肠炎等多种症状 。 犬细小病毒属于细小病毒科细小病毒属成员 ， 编码 ２ 个结构蛋白（VP１ 和 VP２） ， 其中 VP２ 蛋白可诱导机体产生中和抗体 ， 是保护性颗粒抗原 。 VP２ 蛋白中一些具有生物学意义的主要抗原位点的变异导致了病毒抗原特性和宿主范围的改变 。 CPV‐２ 于 ２０ 世纪７０ 年代后期被发现不久之后 ， CPV‐２ 逐渐被新的抗原变异株 CPV２‐a 和 CPV２‐b 取代外一种新的变异样品序列 CPV２‐c 被证实在欧美国家广泛存在CPV‐２C 变异样品序列也存在于我国繁的贸易交流 ， 犬细小病毒不断出现新的变异样品序列 ， 流行病学呈现复杂态势 ， 导致免疫失败现象时有发生 ， 为犬细小病毒病的预防和控制带来了很大困难 。 由于目前几乎没有关于犬细小病毒云南株流行样品序列基因型的相关报道 。 本研究通过对细小病毒云南分离株 VP２ 基因进行遗传进化和氨基酸位点突变的分析 ， 调查云南省犬细小病毒分子流行变异情况 ， 为该病的防制提供一定的理论参考依据 。１ 　 材料与方法１ ． １ 　 材料１ ． １ ． １ 　 病料来源 　 采自云南省不同地区发生疑似［１‐３］。 近年来 ， 另［４］，国内学者于 ２０１０ 年发现并证实［５‐６］。 随着频犬细小病毒犬场及宠物医院病犬粪便 ， 样品相关信息见表 １ 。表 １ 　 样品相关信息Table １ 　 Related information of sample gene sequence编号№ ．２０１２YN‐１２０１２YN‐２２０１２YN‐３２０１２YN‐４２０１２YN‐５２０１３YN‐６２０１３YN‐７２０１３YN‐８２０１３YN‐９２０１３YN‐１０２０１３YN‐１１２０１３YN‐１２２０１３YN‐１３１ ． １ ． ２ 　 主要试剂 　 DNA 聚合酶 、pMD体 、 限制性内切酶 BsrⅠ 、Hind Ⅲ 等分子生物学试剂为宝生物工程（大连）有限公司产品 ； 其它试剂由云南农业大学动物科学技术学院动物传染病实验室提供 。１ ． １ ． ３ 　 仪器 　 移液器 、超净工作台 、高速冷冻离心机 、 恒温水浴锅 、PCR 仪 、电泳槽 、凝胶电泳成像仪等设备由云南农业大学动物科学技术学院动物传染病实验室提供 。１ ． ２ 　 方法１ ． ２ ． １ 　 引物设计与合成 　 VP２ 序列全长 １ ７５５ bp ，样品来源Source of sample昆明 Kun Ming昆明 Kun Ming昆明 Kun Ming玉溪 Yu Xi玉溪 Yu Xi玉溪 Yu Xi保山 Bao Shan普洱 Pu Er普洱 Pu Er安宁 An Ning安宁 An Ning曲靖 Qu Jing大理 Da Li收集时间Collection time２０１２ 年２０１２ 年２０１２ 年２０１２ 年２０１２ 年２０１３ 年２０１３ 年２０１３ 年２０１３ 年２０１３ 年２０１３ 年２０１３ 年２０１３ 年登录号Accession № ．KM４９６２８７KM４９６２８８KM４９６２８９KM４９６２９０KM４９６２９１KM４９６２９２KM４９６２９３KM４９６２９４KM４９６２９５KM４９６２９６KM４９６２９７KM４９６２９８KM４９６２９９TM１８‐T 载>>>>>>>>>RRRRÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄÄ

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