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China Pharmacy 2014 Vol. 25 No. 3 中国药房 2014年第25卷第3期紫草为紫草科多年生草本植物新疆紫草Arnebia euchro-ma（Royle）Johnst.或内蒙紫草A. guttata Bunge的干燥根，主产于新疆和内蒙古等地。它始载于《神农本草经》，列为中品，具有清热凉血、活血解毒、透疹消斑的功能，用于治疗血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿疹、水火烫伤，是中医临床常用药物 [1] 。2010年版《中国药典》（一部）收载紫草的含量测定方法，一是用紫外分光光度法测定羟基萘醌类总色素（以左旋紫草素计）的含量；二是用高效液相色谱（HPLC）法测定 β，β’-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量。但是笔者经研究发现，从市场上收集和从产地采集的10批不同产地的紫草中，左旋紫草素和β，β’-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量均极少或无法检测到。前期试验中，笔者分离到10批药材中均会出现一个主要成分，经结构鉴定是β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁（β-acetoxyisovaleryalkan-nin）[2] 。因此，本研究以β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁为指标性成分，建立了10个不同产地紫草药材的HPLC指纹图谱，并对紫草中β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁的含量进行测定，旨在为紫草药材全面的质量控制提供全新的科学依据，也为2015年版《中国药典》有关紫草的标准修订提供新的证据。1 材料1.1 仪器HPLC仪，含G1312B型色谱泵、G1315C型二极管阵列检测器（DAD）、G1367D 型自动进样器、在线脱气机、Chem-Station for LC 3D型色谱工作站（美国Agilent公司）；SB5200型超声波清洗机[必能信超声（上海）有限公司]；R200D型电子分析天平（德国 Sartorius 公司）；R210 型旋转蒸发仪（瑞士Buchi公司）。Δ 基金项目：香港特别行政区卫生署《香港中药材标准》项目（No.DH/TCMD/HKCMMS/12-80/98C）＊硕士研究生。研究方向：中药质量控制。电话：00852-23587924。E-mail：mihirnisa111@gmail.com# 通信作者：教授，博士。研究方向：中药方剂的作用机制。电话：00852-23587332。E-mail：botsim@ust.hk紫草药材的HPLC指纹图谱研究及其β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁的含量测定 Δ米尔尼沙·阿不都热依木1＊ ，董婷霞 1 ，郭江扬 1 ，阿吉·艾克拜尔艾萨 2 ，詹华强 1 #（1. 香港科技大学生命科学部暨中药研发中心，香港；2.中国科学院新疆理化技术研究所，乌鲁木齐 830001）中图分类号 R284.1；R927.2 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2014）03-0262-04DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2014.03.23摘 要 目的：研究紫草药材的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，并测定其中β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁的含量。方法：色谱柱为ACE C 18 （250 mm×4.6 mm，5 µm），流动相为乙腈-0.1％甲酸溶液（70∶30，V/V），检测波长为516 nm，流速为1.0 ml/min。结果：所得紫草药材的HPLC指纹图谱分离度、精密度、重复性和稳定性均良好；10批紫草药材指纹图谱的相似度均＞0.950。β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁的进样量在0.3～9.0 μg范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系（r＝0.999 9）；平均加样回收率为101.40％，RSD＝4.08％（n＝6）；不同产地紫草药材中β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁的含量差异较大。结论：β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁可作为紫草药材含量测定和指纹图谱研究的指标性成分。所建方法可以为2015年版《中国药典》紫草药材标准的修订提供一定的依据。关键词 紫草；指纹图谱；高效液相色谱法；β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁；含量测定Analysis of HPLC Fingerprints and Content Determination of β-acetoxyisovaleryalkannin inArnebiae RadixMiernisha·Abudureyimu 1 ，DONG Ting-xia 1 ，GUO Jiang-yang 1 ，Haji·Aikebaieraisa 2 ，TSIM Wah-keung Karl 1 （1.LifeScience Division&Center for Chinese Medicine R&D，Hong Kong University of Science and Technology，HongKong，China；2.Xinjiang Technical Institute of Physics and Chemistry，China Academy of Science，Urumqi830001，China）ABSTRACT OBJECTIVE：To study HPLC fingerprints of Arnebiae Radix，and to determine the contents of β-acetoxyisovaleryal-kannin. METHODS：The determination was performed on ACE C 18 column（250 mm×4.6 mm，5 µm）with mobile phase consistedof acetonitrile-0.1 ％ formic acid（70 ∶ 30，V/V）at the flow rate of 1.0 ml/min. The detection wavelength was set at 516 nm. RE-SULTS：HPLC fingerprints of Arnebiae Radix showed good separation，precision，reproducibility and stability；the similarity ofthe fingerprints in 10 batches of Arnebiae Radix was more than 0.950. The linear range of β-acetoxyisovaleryalkannin were 0.3-9.0 μg（r＝0.999 9）with an average recovery of 101.40％（RSD＝4.08％，n＝6）. The contents of β-acetoxyisovaleryalkannin from differ-ent habitats were significantly different from each other. CONCLUSIONS：β-acetoxyisovaleryalkannin can be good chemical markerfor the content determination and fingerprint study of Arnebiae Radix. It can provide basis for the verification standards of ArnebiaeRadix in Chinese Pharmacopeia（2015 edition）.KEYWORDS Arnebiae Radix；Fingerprint；HPLC；β-acetoxyisovaleryalkannin；Content determination· ·262