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    188宝金博页面版: 鸡败血支原体的分离鉴定

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    内容提示： 研宪囊U t鸡赕康熏愿倦的矜赢鉴定王可洲，朱瑞良( 山东农业大学动物科技学院，泰安271018)摘要：从山东地区疑似有慢性呼吸道疾病( CRD) 的鸡场采集病料，分离到4个支原体椿。经茵落、茵体形态观察、生理生化鉴定、血清学鉴定等一系列试验，证明分离的4株支原体为鸡败血支原体( M C) 。关键词：慢性呼吸道。患Π苎г澹环掷爰Π苎г宀∈羌Φ囊恢纸哟バ月院粑来静。临床特征为咳嗽、流鼻液、气喘、呼吸杂音等，死亡率不高，但病程较长，经济损失比较严重。目前本病已成为：ρσ底钛现氐拇静≈。我们通过流行病学调查，从疑似CRD的鸡场采集病料进行了...

    文档格式：PDF | 页数：2 | 浏览次数：186 | 上传日期：2014-12-28 05:30:18 | 文档星级：
    研宪囊U t鸡赕康熏愿倦的矜赢鉴定王可洲，朱瑞良( 山东农业大学动物科技学院，泰安271018)摘要：从山东地区疑似有慢性呼吸道疾病( CRD) 的鸡场采集病料，分离到4个支原体椿。经茵落、茵体形态观察、生理生化鉴定、血清学鉴定等一系列试验，证明分离的4株支原体为鸡败血支原体( M C) 。关键词：慢性呼吸道。患Π苎г澹环掷爰Π苎г宀∈羌Φ囊恢纸哟バ月院粑来静。临床特征为咳嗽、流鼻液、气喘、呼吸杂音等，死亡率不高，但病程较长，经济损失比较严重。目前本病已成为：ρσ底钛现氐拇静≈。我们通过流行病学调查，从疑似CRD的鸡场采集病料进行了M G的分离鉴定，现报告如下：1材料与方法材料1．1．1痛料疑似CRD 的病鸡11只．分别采白山东地区4个养鸡。杉硗泛推易魑掷氩牧。M G 和M S平板凝集抗原及抗血清购白中国兽药监察所。培养基固体和液体培养基都是采用中国兽药监察所设计的CVB禽源支原体分离培养基，内含乳蛋白水解物、酵母浸出物、健康猪血清、N AD、盐酸半胱氨酸、青霉素和醋酸铊等成份。方法支原体的分离按贺荣莲( 1996) 的方法，无菌采集各鸡喉头、气囊部位，先用含1000单位／Inl 青霉素的H ank’ s液漂洗3次，然后剪成Itam 3左右的碎块，按1／10的量加入装有4ri d左右液体培养基的试管中，37' E培养或从加有组织块的液体培养基中取出0．3m 1，加入固体培养基平皿中，置37' E5％CO ：的湿润环境下培养，每天两次观察液体培养基的PH 变化。当颜色由红色变为砖红色或黄色时，表明可能有支原体生长，从变色试管取0．2m l 再接收辖日期：2∞㈣3—18l ，】l -1．21．1．31．21．2．1种固体和液体培养基进行分离纯化，而固体培养基则培养5d，观察有无菌落生长，若有疑似菌落则挑取单个菌落，接种液体和固体培养基进行分离纯化，直到得到纯化的支原体菌株。支原体形态观察液体培养基涂片，固体培养基则挑取典型菌落涂片，自然干燥，甲醇固定，姬姆萨染色20h，1000倍显微镜下观察。菌落形态观察：将培养皿置40倍显微镜下观察。L一型细菌的检验将分离菌株接种于无青霉素和醋酸铊的培养基中连续传5代，涂片染色镜检，看是否恢复细菌形态。培养物的部分理化特性鉴定用纯化后的菌株进行下列试验。胆回醇需要试验按张道永( 1999) 的方法进行，将菌体均匀涂布于琼脂培养基，贴以浸有0．02Ⅱl l 1．5％洋地黄皂苷酒精溶液的直径6m m 的滤纸片，观察圆纸片周围有无抑制生长现象。抑制带>0．3em 即判为阳性，表明其生长需要胆固醇。氯化四唑氮还原试验固体培养基中不加葡萄糖和酚红，而加0．02％的氯化四唑氮，将纯化后的菌株接种于上述培养基中，按1．2．1的方法培养，培养基呈浅红色或红色为阳性。茵落着色试验采用D i em m 染色法，将菌落染色、镜检，观察菌落中心是否呈深兰色。分解葡萄糖和精氨酸试验液体培养基中分别加葡萄糖和精氨酸，调pH 至7．4，接茵后培养3—5d，若变黄则为发酵葡萄糖，若变紫红色则为发酵精氨酸。1．2．21．2．31．2．41．2．4．11．2．4．21．2．4．31．2．4．4 万方数据

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