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    188宝金博页面版: 枯草芽孢杆菌生长培养基的优化

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    内容提示： 枯草芽孢杆菌生长培养基的优化曹龙奎 吴泽柱 盛 艳（黑龙江八一农垦大学食品学院 黑龙江省农产品加工工程技术研究中心 黑龙江大庆 163319 ）摘要 为获得生长活力较好，可以满足菌种水解玉米蛋白粉生产玉米肽的需要，以 OD 600 为评价指标，采用单因素试验确定菌种生长适宜的培养基成分，即：葡萄糖 2% （碳源）、大豆蛋白胨 4% （氮源）、 MgSO 4 0.15% 、 K 2 HPO 40.2％ 、 KH 2 PO 4 0.2％ 。 以单因素试验菌种生长适宜的培养基成分作为二次旋转正交试验的零水平，以菌种生长14 h 的 OD 600 为指标， 确定培养基成分的最优组合为葡萄糖 2％ 、 大豆蛋白胨 3.6％ 、 MgSO 4 0.16％ 、 K ...

    文档格式：PDF | 页数：6 | 浏览次数：98 | 上传日期：2020-10-17 21:35:45 | 文档星级：
    枯草芽孢杆菌生长培养基的优化曹龙奎 吴泽柱 盛 艳（黑龙江八一农垦大学食品学院 黑龙江省农产品加工工程技术研究中心 黑龙江大庆 163319 ）摘要 为获得生长活力较好，可以满足菌种水解玉米蛋白粉生产玉米肽的需要，以 OD 600 为评价指标，采用单因素试验确定菌种生长适宜的培养基成分，即：葡萄糖 2% （碳源）、大豆蛋白胨 4% （氮源）、 MgSO 4 0.15% 、 K 2 HPO 40.2％ 、 KH 2 PO 4 0.2％ 。 以单因素试验菌种生长适宜的培养基成分作为二次旋转正交试验的零水平，以菌种生长14 h 的 OD 600 为指标， 确定培养基成分的最优组合为葡萄糖 2％ 、 大豆蛋白胨 3.6％ 、 MgSO 4 0.16％ 、 K 2 HPO 40.28％ 、 KH 2 PO 4 0.28％ 。 在此条件下菌种培养 14 h ，其 OD 600 由 0.900 上升到 1.869 ，菌株生长量提高了 1 倍。关键词 枯草芽孢杆菌； 培养基； 二次旋转正交实验文章编号 1009-7848 （ 2009 ） 06-0104-06玉米蛋白粉是湿法生产玉米淀粉的副产物，其蛋白质含量高（ 60%～70% ），是一种较好的蛋白源 [1] 。 虽然其中含有大量的醇溶蛋白，这些蛋白中又含有高比例的 Ile 、 Leu 、 Val 和 Ala ， 具有很强的疏水性，但缺少人体必需的赖氨酸，所以绝大部分的玉米蛋白粉只作为廉价的饲料使用 [2] 。每年随生产废液带走大量的玉米蛋白 [3] 。将玉米蛋白转化为具有功能性成分的蛋白水解物 - 肽，可以提高玉米加工副产物的利用率以及经济价值， 具有重要的现实意义。 利用微生物法将玉米蛋白粉水解成简单小肽， 既可以降低成本又可以通过微生物自身的代谢将玉米肽间的肽键转接、重组，修饰玉米肽两端的疏水性氨基酸，降低其苦味 [4] 。 天然菌种的生长能力有限，本文通过优化培养基组分，提高菌种的生长量， 为发酵玉米蛋白粉生产玉米肽提供以试验数据。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌种 优化菌种： 黑龙江八一农垦大学食品学院自行筛选的枯草芽孢杆菌 k-1 。1.1.2 主要试剂 牛肉膏、葡萄糖、果糖、蔗糖、可溶性淀粉、甘油、蛋白胨、大豆蛋白胨、胰蛋白胨、酵 母 浸 粉 （ 生 化 试 剂 ）； NaCl 4 、 MgSO 4 、 K 2 HPO 4 、KH 2 PO 4 、 CaCl 2 、 NaOH 、 NH 4 NO 3 、 （ NH 4 ） 2 SO 4 （ 分 析纯）。1.1.3 主要培养基 基础培养基 （ % ）： 牛肉膏0.3 ，蛋白胨 1 ， NaCl 0.5 ， pH 7.2～7.4 。1.1.4 生物量测定方法 用 250 mL 锥形瓶分装50 mL 基础种子培养基， 接种后， 于 37 ℃ ， 160 r/min 条件下震荡培养 12 h 。 发酵完成后， 取 1 mL发酵液，以接种前培养基为空白，用分光光度计测定波长 600 nm 处的 OD 值。2 结果与分析2.1 发酵培养基中各单因素的确定2.1.1 碳源种类及浓度对菌种生长的影响 将基础种子培养基中 0.3% 的牛肉膏换成相同质量分数的葡萄糖、果糖、蔗糖、甘油、可溶性淀粉，其它成分不变，接种培养。 每隔 2 h 测定生物量，菌种的绘制生长曲线。 由图 1 可知，葡萄糖作为种子培养基的碳源优于其它碳源， 培养 8 h 达到最大生长量， OD 600 值为 0.978 。 这是因为葡萄糖作为碳源时可被菌体直接利用， 而其它碳源需要被分解为单糖时才能利用。 果糖作为碳源时， 12 h 达到最大收稿日期： 2008-12-30基金项目： 黑龙江省农垦总局“十一五”课题（ No.HNKXIV-03-05 ）作者简介： 曹龙奎，男， 1965 年出生，博士，教授Vol． 9 No． 6Dec． 2 0 0 9 Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology中 国 食 品 学 报第 9 卷 第 6 期2 0 0 9 年 12 月

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