第１０ 卷第６ 期２０ １０ 年１２月过程工程学报Ｔ ｈ ｅＣ ｈ ｉｎ ｅ ｓｅＪｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌｏ ｆＰ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓｓＥ ｎ ｇ ｉｎ ｅ ｅ ｒ ｉｎ ｇＶ ｂ ｌ． １０ Ｎ Ｏ ． ６Ｄ ｅ ｃ ． ２ ０ １０Ｃ ｅ３＋ 与牛血清白蛋白的相互作用的研究吴锦绣１” ，李梅。 ２，宋玉民３，柳召刚１，２胡艳宏１’ ２，王觅堂１’ ２（ １． 内蒙古科技大学稀土学院， 内蒙古包头０ １４ ０ １０ ： ２． 内蒙古自治区高校稀土现代冶金新技术与应用重点实验室， 内蒙古包头０ １４ ０ １０ ．３． 西北师范大学化学化工学院， 甘肃兰州７ ３０ ０ ７ ０ ）摘要： 在模拟动物体生理ｐ Ｈ 值条件下， 用荧光光谱法和紫外吸收光谱法研究了稀土离子铈［ Ｃ ｅ３＋ 和Ｃ ｅ２（ ｃ０ ３）３】 与牛血清白蛋Ｅ Ｉ（ Ｂ Ｓ Ａ ）的结合反应． 探讨了Ｃ ｅ３＋ 和Ｃ ｅ２（ ｃ０ ３）３对Ｂ Ｓ Ａ 的荧光猝火过程机理， 并分别计算了不同温度下Ｃ ｅ计和Ｃ ｅ ２（ Ｃ ０ ３）３与Ｂ Ｓ Ａ 的结合常数（ Ｋ Ａ ）和实际热力学参数（ Ａ ｎ ， Ａ Ｇ 和ａ ｓ）， 并判断了Ｃ ｅ ” 和Ｃ ｅ ２（ ｃ０ ３）３与Ｂ Ｓ Ａ 结合的作用力类型． 由于所求热力学常数都是Ａ Ｈ ＜ ０ ， Ａ Ｓ Ｍ ）， 由此可判断Ｃ ｅ３十和Ｃ ｅ２（ ｃ０ ３）３与Ｂ Ｓ Ａ 之间的作用力主要为静电引力． 实验结果表明， ｃｅ３＋ 和Ｃ ｅ２（ ｃ０３）３与Ｂ Ｓ Ａ 结合形成复合物， 分别为： ｎ（ Ｃ ｅ３＋ ）： 栉（ Ｂ ｓＡ 户１． ８： ｌ， ｎ［ Ｃ ｅ２（ ｃ０３）３】 ： 订（ Ｂ ｓＡ 产２． ６： １．导致Ｂ Ｓ Ａ 内源性荧光猝灭是由于分子内的非辐射能量转移而引起的静态猝灭．关键词： ｃｅ” ； 牛血清白蛋白； 荧光光谱； 紫外光谱中图分类号： ０ ６１４ ． ３文献标识码： Ａ文章编号： １０ ０ ９ － ６０ ６Ｘ （ ２０ １０ ）０ ６－ － １１２６－ ０ ６１前言随着稀土在农业及医学上应用的不断深入， 稀土金属离子与生物大分子的配位作用及对生物大分子结构的影响日益受到重视， 稀土金属离子可通过各种途径进入生物体， 同其它金属离子一样进入体内必然会与蛋白质发生作用， 可能影响或改变蛋白质分子固有的结构和功能【ｌ－ ３１． 因此， 研究稀土与蛋白质的相互作用对于稀土金属离子在体内的代谢过程及生物效应的作用机理有实际意义【“】 ， 可以为解决稀土在人体内有无积累， 稀土对人体究竟有利还是有害等问题提供科学依据．血清白蛋白是一种重要的运输蛋白， 它是各种内源性及外源性物质运输和排出体外的主要载体． 关于Ｃ ｕ ２＋ ，ｚｎ ２＋ ， Ｎ ｉ２＋ ， Ｍ ｇ ＋ 等金属离子与血清白蛋白的结合已有许多报道【１】 ． 但对稀土离子（ ＩＩＩ）与血清白蛋白相互作用的研究却很少． 李晓晶掣７ 悃荧光光谱法（ 常温）和平衡透析法研究了Ｔ ｂ３＋ 与Ｂ Ｓ Ａ 的结合常数； 康玉专等【８】 用紫外吸收光谱法（ 常温）和表面增强拉曼光谱法研究了Ｃ ｅ４ ＋ 和Ｅ ｒ３＋ 与牛血清白蛋白的相互作用； 张朝平等（ ９ １用紫外一可见吸收光谱ｆ 常温１和红外光谱法研究了Ｎ ｄ ３＋ 与牛血清白蛋白的相互作用； 宋玉民等【１０】 在前期用荧光光谱法（ 常温和变温）和紫外吸收光谱法（ 常温）研究了Ｅ ｕ ３＋ 和Ｐ ， 与人血清白蛋白的相互作用． 本工作分别在常温和变温情况下用紫外吸收光谱法和荧光光谱法研究稀土离子Ｃ ｅ ” 对牛血清白蛋白的相互作用． 分析了Ｃ ｅ ” 和Ｃ ｅ２（ Ｃ ０ ３）３在常温（ ２０ ℃）与变温（ ３７ ℃）下的紫外吸收光谱图和荧光光谱图， 并分析荧光光谱得出其结合常数Ｋ Ａ和热力学参数△鼠Ａ Ｇ 和△＆据此可以判断它们之间相互作用力的类型、 作用强弱、 结合位点数、 结合常数；从而可以判断Ｃ ｅ３十和Ｃ ｅ２（ Ｃ ０ ３）３对Ｂ Ｓ Ａ 的主要作用力是静电作用力．２实验２． １材料与试剂牛血清白蛋白（ Ｂ Ｓ Ａ ）为美国Ｓ ｉｇ ｍ ａ 公司产品， 用缓冲溶液配制成０． ０１ ｍ ｏ ｌ／Ｌ 的溶液， 在冰箱（ ０℃）中储存；Ｃ ｅ０ ２和Ｃ ｅ２（ Ｃ ０ ３）３为稀土研究院产品， 纯度为９ ９ ． ９ ９ ％；用Ｃ ｅ ０ ２配制成０ ． ０ １ ｍ ｏ ｌ／Ｌ Ｃ ｅＣ ｌ３储备液， Ｃ ｅ２（ Ｃ ０３）３配制成１． ０ ｘ １０ － ５ ｍ ｏ ｌ／Ｌ 的储备液， 实验时根据需要稀释； 配制１０ｍ ｍ ｏ ｌ／Ｌ ＂Ｉｒｉｓ． Ｈ Ｃ ｌ缓冲溶液， ｐ Ｈ ＝ ７ ． ３５， 内含０． １５ｍ ｏ ｌ／Ｌ Ｎ ａ Ｃ Ｉ的溶液． 实验其余用水用二次去离子水， 其余试剂均为分析纯．２． ２实验仪器ｐ Ｈ Ｓ ． ２５型酸度计（ 上海第二分析仪器厂）； Ｔ Ｂ 一８ ５型恒温器（ 日本岛津公司）； 精密电子天平（ Ｏ ． ０００１； 梅特勒．托利多仪器有限公司）； 微量移液器（ ０ － ２０ ０ ¨ Ｌ ）： Ｔ ｕ ． １９ ０ １双光束紫外可见分光光度计（ 北京普析通用仪器有限责任公司）； Ｆ ． ２５００荧光分光光度计（ 日本日立公司）．２． ３实验方法２． ３． １紫外吸收光谱０． ｒｖ ３的测定Ｃ ｅ Ｃ ｌ３溶液、 Ｃ ｅ ２（ ｃ ０ ３）３溶液和Ｂ Ｓ Ａ 溶液均用ｐ Ｈ ＝ ７ ． ３５的缓冲溶液稀释． 在２０ 和３７ ℃下， 向加有５ｍ Ｌ１． ０×１０－ ５ ｍ ｏ ｌ／ＬＢ Ｓ Ａ 溶液的比色管中分别滴加一定体积的Ｃ ｅＣ ｌ３和Ｃ ｅ２（ ｃ０ ３）３溶液， 摇匀后放置５ｍ ｉｎ ， 用相应收稿日期： ２０ １０ － ０ ８ － ２１， 修回日期： ２０ １０ 一ｌｏ － ２ｌ基金项目： 国家自然科学基金资助项目（ 编号： ２０ ９ ６６０ ０ ７ ）； 内蒙古科技大学青年创新基金资助项目（ 编号： ２０ ０ ９ Ｎ Ｃ ０ ７ ２）作者简介： 吴锦绣（ １９ ７ ６－ － ）， 女， 内蒙古乌兰察布盟人， 硕士， 副教授， 主要研究方向为稀土化学和稀土功能材料， Ｅ － ｍ ａ ｉｌ： ｗ ｕ ｊｉｎ ｘ ｉｕ ８８８＠ ｉｍ ｕ ｓｔ。 ｃｎ ．万方数据
