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188宝金博页面版: PCR研究进展综述

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内容提示: PCR 诊断的研究进展 PCR 诊断的研究进展 生命科学学院 09 动物医学 学号:2009082554 姓名:张孝辉 指导老师:陈星星 生命科学学院 09 动物医学 学号:2009082554 姓名:张孝辉 指导老师:陈星星 【摘要】:称 聚合酶链式反应简称 PCR 。聚合酶链式反应(PCR)异 是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期, 循环进行, 使目的 DNA 得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。自从 1986 年由 Mullis[ 1 ] 等首次应用于遗传病基因诊断以来,已有近百种病可用等首次应用于遗传病基...

文档格式:DOC | 页数:8 | 浏览次数:59 | 上传日期:2017-02-11 00:50:56 | 文档星级:
PCR 诊断的研究进展 PCR 诊断的研究进展 生命科学学院 09 动物医学 学号:2009082554 姓名:张孝辉 指导老师:陈星星 生命科学学院 09 动物医学 学号:2009082554 姓名:张孝辉 指导老师:陈星星 【摘要】:称 聚合酶链式反应简称 PCR 。聚合酶链式反应(PCR)异 是体外酶促合成特异 DNA 片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等几步反应组成一个周期, 循环进行, 使目的 DNA 得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。自从 1986 年由 Mullis[ 1 ] 等首次应用于遗传病基因诊断以来,已有近百种病可用等首次应用于遗传病基因诊断以来,已有近百种病可用 PCR 技术进行诊断和产前诊断。 : 【关键词】:PCR ;RT-PCR ;诊断 1. PCR 的概述 1.1 什么是 PCR PCR 技术是聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR),是 80 年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一 DNA 片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA 供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用 PCR 几小时便可完成。PCR 技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。 1.2 PCR 在猪病上诊断的应用 自从 1985 年 Kang Mullis[ 1 ] 向全世界公布 PCR 以来,由于 PCR 优异的性能,短短几年内 PCR 已经在生物科学领域中得到广泛应用。PCR 可在数小时内对仅有几个拷贝的基因放大数万倍,使其在凝胶电泳后形成明显可见的 DNA 条带。在 PCR 技术中,应用于检测FMDV、SHV、PRRSV 等的有 RT-PCR、荧光 RT-PCR、巢式 PCR、实时 PCR 等。宋敏等 [8]建立的 RT-PCR 方法检测口蹄疫病毒,该法可以检出 10TCD50 的病毒含量,同时该方法还有较好的特异性,不与猪的其他病原发生交叉反应; PCR 方法可检测病毒,也能直接检测核酸片段,样品可以是水泡液,也可以直接用扁桃体、淋巴结、肌肉、皮肤等组织,是其他方法无法代替的。但这种方法需要较高的试验设备和分子生物学技术。 通过比较上述的几种分子生物的方法可以得出基因芯片技术、核酸探针技术、聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,这些方法有的费时、费力,有的存在非特异性反应和敏感性低等缺点,因此迫切需要一种快速、敏感、特异的方法来解决生产实际中的问题【 2 】。PCR 技术克服了上

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