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·论 著·中国医药导报 2017 年 11 月第 14 卷第 31 期CHINA MEDICAL HERALD Vol. 14 No. 31 November 2017肺炎是临床上常见病、多发。绮荒芗笆敝瘟，可导致呼吸衰竭、肺心病等，甚至死亡 [1-2] 。细菌脂多糖（ Lipopolysaccheride ， LPS ）是细菌内毒素的主要成分，可参与诱导细胞损伤，加重炎症 [3-4] 。 研究表明 15- 脂氧酶 -1 （ 15-LOX-1 ）可参与调控炎性反应 [5-6] 。 本研究通过体外实验探讨下调 15-LOX-1 对 LPS 作用下肺动脉内皮细胞（ PAECs ）和炎性因子分泌的影响，现将结果报道如下。1 材料与方法1.1 实验动物选取 10 只健康雄性 Wistar 大鼠，月龄 2 个月，SPF 级，体重（ 250±20 ） g ，购于哈尔滨医科大学附属二院实验动物中心（合格证号： 20150921 ）。1.2 材料和仪器白细胞介素 1α （ IL-1α ）、白细胞介素 6 （ IL-6 ）和13-HODE ELISA 试剂盒分别购自美国 R&D 公司和Enzolife 公司。 RNA 提取试剂盒、反转录试剂盒购自美国 invitrogen 公司。 细胞培养试剂购自美国 Hyclone公司。 siRNA 引物由美国 QIAGEN 公司合成。 siRNA沉默构建试剂盒购自美国 Amaxa Biosystems technol-ogy 公司。1.3 方法1.3.1 PAECs 培养和分组 0.25% 胰蛋白酶消化 Wis-tar 大鼠肺动脉内皮细胞层，收集 PAECs 体外培养并随机分为 4 组：正常对照组、 LPS 组、 15-LOX-1 siRNA 对照组（ scramble 组）、 15-LOX-1 siRNA 组。 其中， LPS 组加入 10 μmol/L LPS 刺激培养 48 h ； scramble 组在 LPS组基础上，转染 siRNA 阴性对照于细胞中作用 48 h ； 15-LOX-1 siRNA 组在 LPS 组基础上，转染 15-LOX-115-LOX-1对 LPS作用下肺动脉内皮细胞增殖和炎性因子的影响刘 晔 邢文婧 李思佳哈尔滨医科大学免疫教研室，黑龙江哈尔滨 150081[ 摘要 ] 目的 探讨下调 15- 脂氧酶 -1 （ 15-LOX-1 ）对脂多糖（ LPS ）作用下肺动脉内皮细胞（ PAECs ）和炎性因子分泌的影响。 方法 体外培养 PAECs ，并随机分为 4 组：对照组、 LPS 组、 15-LOX-1 siRNA 对照组（ scramble 组）和 15-LOX-1 siRNA 组。 采用 Real-time PCR 检测 15-LOX-1 表达， MTT 法检测 PAECs 增殖变化， ELISA 法检测产物13-HODE 以及炎性因子白细胞介素 1α （ IL-1α ）和白细胞介素 6 （ IL-6 ）的变化。 结果 与 LPS 组比较， 15-LOX-1siRNA 组 15-LOX-1 mRNA 表达降低， PAECs 增殖增多， 13-HODE 、 IL-1α 和 IL-6 分泌减少，差异有统计学意义（ P < 0.05 ）。 结论 下调 15-LOX-1 可抑制炎性因子分泌，促进 PAEC 增殖，改善 LPS 对内皮的损伤。[ 关键词 ] 肺动脉内皮细胞； 15- 脂氧酶 -1 ；脂多糖；炎性因子[ 中图分类号 ] R563.9 [ 文献标识码 ] A [ 文章编号 ] 1673-7210 （ 2017 ） 11 （ a ） -0024-03The effect of 15-LOX-1 on proliferation of pulmonary arterial endothe-lial cells and inflammatory cytokines by LPSLIU Ye XING Wenjing LI SijiaDepartment of Immunology, Harbin Medical University, Heilongjiang Province, Harbin 150081, China[Abstract] Objective To explore the effect of 15-LOX-1 on proliferation of pulmonary arterial endothelial cells(PAECs) and inflammatory cytokines by LPS. Methods PAECs were cultured in vitro, and divided into 4 groups,including control group, LPS group, 15-LOX-1 siRNA scramble group (scramble group) and 15-LOX-1 siRNA group. Theexpression of 15-LOX-1 mRNA was detected by Real-time PCR. The proliferation of PAECs was examined by MTT.The expressions of 13-HODE, IL-1α and IL-6 were detected by ELISA. Results In the 15-LOX-1 siRNA group, theexpression of 15-LOX-1 mRNA was reduced, the proliferation of PAECs was increased, and the secretions of 13-HODE, IL-1α and IL-6 were reduced compared with the LPS group with statistically significant difference (P < 0.05)Conclusion Down-regulation of 15-LOX-1 can inhibit inflammatory cytokines, regulate PAECs proliferation, andimprove endothelial injury induced by LPS.[Key words] Pulmonary arterial endothelial cells; 15-lipoxygenase-1; Lipopolysaccheride; Inflammatory cytokines[ 基金项目 ] 黑龙江省188宝金博页面版厅科学技术研究项目（ 12511177 ）。[ 作者简介 ] 刘晔（ 1978.4- ），女，博士，副教授：研究方向：呼吸系统疾病发病机制和防治研究。24