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188宝金博页面版: P-糖蛋白诱导剂筛选模型的建立

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内容提示: P-糖蛋白诱导剂筛选模型的建立 P-糖蛋白诱导剂筛选模型的建立 姓名:高凌波 指导教师:曾苏 摘摘 要要 目的目的:建立一种能够快速筛选 P-糖蛋白诱导剂的体外模型,选择荧光素酶报告基因办法来检测传染的基因。方法方法:通过 PCR 获得人 P-糖蛋白基因远端启动子和近端启动子,接着亚克隆入带有荧光素酶报告基因的 Pgl3-basic 载体,重组质粒转化 DH5a 感受态细胞,蓝白筛。羧“咨タ寺∨嘌,提取重组质粒,酶切鉴定;将构建好的 pGL3-P-gP 目的质粒传染入人结肠癌细胞系 Caco-2 细胞中,药物作用后检测荧光素酶报告基因活性。结果结果:酶切后的琼脂糖凝胶电泳鉴定证...

文档格式:PDF | 页数:1 | 浏览次数:38 | 上传日期:2015-06-25 10:24:05 | 文档星级:
P-糖蛋白诱导剂筛选模型的建立 P-糖蛋白诱导剂筛选模型的建立 姓名:高凌波 指导教师:曾苏 摘摘 要要 目的目的:建立一种能够快速筛选 P-糖蛋白诱导剂的体外模型,选择荧光素酶报告基因办法来检测传染的基因。方法方法:通过 PCR 获得人 P-糖蛋白基因远端启动子和近端启动子,接着亚克隆入带有荧光素酶报告基因的 Pgl3-basic 载体,重组质粒转化 DH5a 感受态细胞,蓝白筛。羧“咨タ寺∨嘌,提取重组质粒,酶切鉴定;将构建好的 pGL3-P-gP 目的质粒传染入人结肠癌细胞系 Caco-2 细胞中,药物作用后检测荧光素酶报告基因活性。结果结果:酶切后的琼脂糖凝胶电泳鉴定证明成功构建了方案 1 的 pGL3-P-gP 目的质粒。传染入人结肠癌细胞系 Caco-2 细胞中,荧光素酶报告基因检测,方案 1 所构建的重组质粒没有转录激活活性,方案 2 重组质粒 pGL3-P-gP 尚在构建中。结论结论:方案 1 所构建的重组质粒不适用筛选P-糖蛋白诱导剂, 方案 2 正在构建中, 有可能可以成为筛选 P-糖蛋白诱导剂的一个良好体外模型,快速筛选 P-糖蛋白诱导剂。 关键词:关键词:

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