188宝金博页面版

动物医学进展， ２０１３， ３４ （ ７ ）： ８０—８３Ｐ ｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓｓｉｎＶ ｅ ｔｅ ｒ ｉｎ ａ ｒ ｙＭ ｅ ｄ ｉｃ ｉｎ ｅ猪捷申病毒检测方法研究进展庄金秋， 梅建国， 李峰， 沈志强（ 山东省滨州畜牧兽医研究院， 山东滨州２５６ ６ ０ ０ ）摘要： 猪捷申。 Ｐ Ｔ Ｄ ）是：ρ硪档囊恢种匾静。 论文概述了猪捷中病毒（ Ｐ Ｔ Ｖ ）实验室检测方法的研究进展。 在细胞生物学方面， 主要依靠病毒分离培养、 病毒电镜形态检查、 病毒特异性抗原及其抗体的检查等。 在分子生物学方面， 主要依靠国内外相继建立起的Ｒ Ｔ —Ｐ Ｃ Ｒ 技术和实时荧光定量Ｒ Ｔ —Ｐ Ｃ Ｒ 技术等。 介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性， 为临床兽医科技工作者建立快速、 简便、 准确、 实用的检测方法提供参考。关键词： 猪捷申病毒； 检测方法； Ｐ Ｃ Ｒ中图分类号： ￥ ８ ５２． ６ ５９ ． ６文献标识码： Ａ文章编号： １０ ０ ７ —５０ ３８ （ ２０ １３）０ ７ —０ ０ ８ ０ —０ ４猪捷申。 Ｐ ｏ ｒ ｃｉｎ ｅ ｔｅ ｓｃ ｈ ｅ ｎｄ ｉｓｅａ ｓｅ， Ｐ Ｔ Ｄ ）是由。 Ｎ Ａ 病毒科捷申病毒属的猪捷申病毒（ Ｐ ｏ ｒ ｃ ｉｎ ｅｔｅ ｓｃｈ ｏ ｖ ｉｒ ｕ ｓ， Ｐ Ｔ Ｖ ）引起的以猪脑脊髓灰质炎、 母猪繁殖障碍、 肺炎、 下痢、 心包炎、 心肌炎、 皮肤损伤及无症状等为主要表现的一种病毒性传染。 １‘３］。 该病于１９ ２９ 年首次发现于捷克斯洛伐克的捷申地区，所以又称“捷申病” ， 各年龄阶段的猪均易感， 并具有很高的病死率（ ９ ０ ％以上）。 ２０ 世纪５０ 年代， 英国发生类似疾。 但猪群病死率相对较低， 从感染猪体内分离到的毒株命名为Ｔ ａ ｌｆ ａ ｎ ， 后发现引起此次疫情的Ｔ ａ ｌｆ ａ ｎ 毒株与Ｔ ｅ ｓｃ ｈ ｅ ｎ 毒株均属于猪捷申病毒的血清１型（ Ｐ Ｔ Ｖ 一１型）［ ４ ］。 后来由毒力较弱的毒株引起的温和型脑脊髓炎也称为“塔番病” ， 又称“塔法病” 或“塔尔凡病” （ Ｔ ａ ｌｆ ａ ｎ ｄ ｉｓｅａ ｓｅ）。 猪捷申病主要流行于欧洲， 随后流传至北美、 非洲、 澳大利亚和日本等国口］。 ２０ ０ ３年， 我国哈尔滨兽医研究所研究人员从内蒙古地区某猪场分离到一株猪捷申病毒，证实我国也有该病毒的存在邵］。 目前该病已分布到世界各地， 给养猪业带来了巨大损失， 已成为世界范围内猪的重要传染病之一。 Ｐ Ｔ Ｖ 共有１１个血清型， 即Ｐ Ｔ Ｖ 一１型～Ｐ Ｔ Ｖ 一１１型［ ７ ｛ ］。 不同型毒株感染猪群后产生的临床症状也略有不同， 严重者可造成猪群的大批量死亡； 轻微者也可无明显临床症状。其中由Ｐ Ｔ Ｖ 一１型引起的脑脊髓炎被国际兽疫局列为Ｂ 类传染。 严重阻碍了各国养猪业的发展。 近年来， Ｐ Ｔ Ｖ 致病力逐渐减弱， 未对养猪业造成严重影响， 但其潜伏感染仍应引起高度重视。 本文就Ｐ Ｔ Ｖ 的实验室检测方法研究进展做一综述， 以为猪捷申病的诊断和防控提供参考。１病毒的分离鉴定１． １病毒的细胞培养病毒分离鉴定是Ｐ Ｔ Ｖ 鉴定最为准确、 可靠的方法， 特别是对新发生本病的地区更为重要。 Ｐ Ｔ Ｖ 能在猪源细胞如原代、 次代的猪肾细胞、 Ｐ Ｋ 一１５细胞、ＩＢ Ｒ Ｓ － ２细胞， Ｓ Ｔ 细胞等多种细胞上增殖并产生细胞病变（ ｃｙ ｔｏ ｐ ａ ｔｈ ｉｃ ｅｆ ｆ ｅｃｔ， Ｃ Ｐ Ｅ ）。 不同毒株所产生的Ｃ Ｐ Ｅ 不同， 主要表现为细胞呈圆形， 葡萄样聚集破碎、 脱落； 细胞内颗粒增多， 周围呈星状突起等。发病早期， 采集病猪脑组织、 脊髓、 肝脏、 脾脏、 大肠和小肠、 淋巴、 肾上腺、 胸腺以及粪便、 分泌物等组织脏器通过研磨制成组织悬液， 离心取上清， 过滤除菌后接种到Ｐ Ｋ 一１５细胞等适应Ｐ Ｔ Ｖ 生长的细胞上，培养观察细胞病变情况。 急性发病猪在脑和脊髓中较易分离到Ｐ Ｔ Ｖ ， 隐性感染猪主要粪便、 肠、 分泌物中分离到病毒。 病毒分离往往初代培养的病毒滴度低， 细胞病变不明显， 因此需盲传几代。 培养的细胞可作间接免疫荧光试验鉴定抗原。 病毒分离方法虽然可靠， 但也存在一定的缺点， 如步骤较繁琐， 需要长时间观察， 不能鉴别血清型等。１． ２免疫电镜技术电镜技术用于病毒粒子的鉴定较为直观、 灵敏。Ｆ ｅ ｎ ｇ Ｌ 等［ ６ ］报道分离的Ｐ Ｔ Ｖ 病毒粒子在电镜下呈收稿日期： ２０ １３—０ ３—０ １基金项目： 山东省现代农业产业技术体系生猪产业创新团队项目作者简介： 庄金秋（ １９ ７ ８ 一）， 女， 山东潍坊人， 在职兽医硕士， 助理研究员， 主要从事细胞培养和动物用病毒疫苗研制。万方数据