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    188宝金博页面版: 沼泽型水牛NANOG基因5

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    内容提示： 畜牧兽医学报2013．44( 3) ：387—394Acta Veteri nari a et Zootechni ca Si ni ca沼泽型水牛N AN O G 基因57调控序列克隆与功能分析崔奎青，张会娜，刘帅，刘晓华，杨素芳，刘庆友+，石德顺。( 广西大学，亚热带生物资源保护利用国家重点实验室，南宁530004)摘要：为探讨沼泽型水牛N AN O G 基因的表达调控模式，本研究扩增克隆了广西本地沼泽型水牛N AN O G 基因的5’ 调控序列片段，设计了一1 213、一745、一425和一312 bp 4个缺失体片段，分别构建成EG FP报告载体。应用显微注射报告载体生产转基因水：椭砼咛，并转染水牛胎儿成纤维细胞。结果发现，EG FP的表达仅限于水牛囊胚...

    文档格式：PDF | 页数：9 | 浏览次数：11 | 上传日期：2015-05-05 03:42:56 | 文档星级：
    畜牧兽医学报2013．44( 3) ：387—394Acta Veteri nari a et Zootechni ca Si ni ca沼泽型水牛N AN O G 基因57调控序列克隆与功能分析崔奎青，张会娜，刘帅，刘晓华，杨素芳，刘庆友+，石德顺。( 广西大学，亚热带生物资源保护利用国家重点实验室，南宁530004)摘要：为探讨沼泽型水牛N AN O G 基因的表达调控模式，本研究扩增克隆了广西本地沼泽型水牛N AN O G 基因的5’ 调控序列片段，设计了一1 213、一745、一425和一312 bp 4个缺失体片段，分别构建成EG FP报告载体。应用显微注射报告载体生产转基因水：椭砼咛，并转染水牛胎儿成纤维细胞。结果发现，EG FP的表达仅限于水牛囊胚内细胞团。各缺失体在猪4．5 d胚胎中均能启动下游EG FP的表达，转录活性两两之问差异均极显著，按活性从大到小依次为一745、一425、一1 213和一312 bp。各缺失体报告载体转染水牛成纤维细胞48 h后均可见少数细胞发特异性表达；一1 2；13～一745bp含有多能细胞特异性的抑制子元件；?745312bp含有非多能细胞特异性的增强子元件。光，其中～425 bp活性极显著高于其他缺失体，一l 213与一745 bp之间无显著差异，二者均极显著高于一3；12 bp。增强子元件；?425关键词：沼泽型水牛；N AN O G ；调控序列；克隆以上结果说明，水牛N AN O G 基因翻译起始位点上游一1 2；13 bp在水牛囊胚中可以调控N AN O G 在内细胞团中的425bp含有多能性细胞特异性的中图分类号：$823．83；$813．3文献标志码：A文章编号：0366—6964( 2013) 03—0387—08Cl oni ngand Functi onAnal ysi sofSw am pBuf f al o N AN O GG ene 57Regul atory Regi onCU IKui —qi ng，ZH AN G H ui —na，LIU Shuai ，LIU Xi ao- hua，YAN GSu-fang，LI UQ i ng-you’ ．SH I D e-shun’( StateKey Laboratory of Conservati on and U ti l i zati onof Subtropi cal Agro-bi oresources，G uangxi U ni versi ty，N anni ng 530004，Chi na)cel l s m ass( ICM ) ．Inthe 4．5 dpi g em bryos，theEG FP coul d be observed i n al l reporter vectors．Aftertranfecti ngthe fourreporter pl asm i dsi nto buffal o fetal fi brobl ast about 48 h．fl uorescencecoul d be observed i n a sm al l num ber of cel l s i n al l groups．Q RT—PCR anal ysi sshow ed that thedi fferences of thetranscri pti onalacti vi ty f romeach other w erehi ghl y si gni fi canti npi g4．5 d em —bryo cel l s，the- - 745 bp fragm ent had the hi ghest acti vi ty，fol l ow ed by- - 425 bp，then—l213bpandfi nal l y- - 312 bp．In buffal o fetalfi brobl asts，the acti vi ty of 一425bp f ragm entw assi gni fi cantl yhi gherthan that of the others，there w as nosi gni fi cantdi fference betw een一1 213 and一745bp．and the both w eresi gni fi cantl y hi gher than that of 一312bp f ragm ent．Theseresul ts i ndi catedthat．i n buffal o bl astocystt he一12 1 3 bp f ragm entcan m edi atespeci fi c expressi onofbuffal o收稿日期：2012-06—27基金项目：国家高技术研究发展计划( 863) 项目( 2011AAl 00607) ；国家转基因重大专项( 2011ZX08007—003) ；国家自然科学基金( 30960251)作者简介：崔奎青(1975一)，女，山东菏泽人，博士。副教授，主要从事动物生物技术研究，E—m ai l ：kqcui @ 126．CO ITI*通信作者：刘庆友，研究员，E—m ai l ：qyl i u2002@ 126．corn；石德顺，研究员，E—m ai l ：ardsshi @ gxu．edu．cn万方数据

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