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188宝金博页面版: 【精品】园艺植物原生质体融合技术研究进展

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内容提示: 1 引言 原生质体融合 (protoplast fusion)亦称细胞融合 (cell fusion)、体细胞 杂 交 (somatic hybridization)、 超 性 杂 交(Para sexual hybridization) 或超 性 融 合 (Para sexual fusion ),是指不同种类的原生质体不经过有性阶段, 在一定条件下融合创造杂种的过程[1]。 植物细胞融合技术包括原生质体的制备、 细胞融合的诱导、 杂种细胞的筛选和培养, 以及植株的再生和鉴定等环节。 原生质体融合涉及了双亲的细胞质, 它不仅可以把细胞质基因转移到全新的核背景中, 也可使叶绿体基因组或线粒体基因组间重新组合。 原生质体融合还可避免受精作用中的种...

文档格式:DOC | 页数:8 | 浏览次数:15 | 上传日期:2015-12-31 22:11:36 | 文档星级:
1 引言 原生质体融合 (protoplast fusion)亦称细胞融合 (cell fusion)、体细胞 杂 交 (somatic hybridization)、 超 性 杂 交(Para sexual hybridization) 或超 性 融 合 (Para sexual fusion ),是指不同种类的原生质体不经过有性阶段, 在一定条件下融合创造杂种的过程[1]。 植物细胞融合技术包括原生质体的制备、 细胞融合的诱导、 杂种细胞的筛选和培养, 以及植株的再生和鉴定等环节。 原生质体融合涉及了双亲的细胞质, 它不仅可以把细胞质基因转移到全新的核背景中, 也可使叶绿体基因组或线粒体基因组间重新组合。 原生质体融合还可避免受精作用中的种的特异性配子识别反应, 有可能打破远亲杂交中的有性不亲和界限。 原生质体技术还可用于种质资源的保存、 细胞突变体的筛选、 细胞器移植和外源 DNA 的导入等方面。 原生质体融合技术起源于 20 世纪 60 年代, 是基因重组技术的一部分。 经过一定的理化条件处理,使外源目 的基因进入受体细胞, 并得以表达, 以期使得受体细胞在原有性状的基础上, 获得所需的新的特殊性状[2]。 1953 年 we bull 首先用肤聚糖水解酶, 溶菌酶得到巨大芽胞杆菌的原生质体, 1960 年 Cocking 用酶法分离出番茄根原生质体后, Nagata 等首次利用烟草叶分离原生质体, 经培养获得再生植株, 1972 年Carlson 等以烟草获得了 体细胞杂种[4] , 1974 年高国楠发现聚乙二醇(PEG) 在钙离子存在的条件下能促使植物细胞原生质体融合, 1975 年 Vardi 等首次从木本植物Shamonti 甜橙珠心组织诱导胚性愈伤组织, 并从愈伤组织分离原生质体,经培养通过胚状体再生出植株, 1985 年 Fujimura 等率先在水稻原生质体培养中获得了再生植株 并从许多种内、 种间、 属间甚至亚科间的体细胞杂交获得杂种细胞系或杂种植株。 随着多种植物原生质体的成功培养和融合技术的不断改进, 植物细胞融合获得了巨大成功。 近年来原生质体融合技术进展十分迅速, 利用原生质体直接进行遗传转化的发展也引起了 普遍的关注, 为工农业生产实践开辟了广阔的发展前景。 2 原生质体融合方法 早期原生质体融合方法有: 硝酸钠法、 高 Ca+高 pH 法、 聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)、 PEG 与高 Ca+ 高 pH 相结合法、 电融合法以及聚集微束激光法。 目前,国内外实验室广泛使用的是化学法中的 PEG 一高 Ca+ 高 pH 法和物理法中的电融合

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