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188宝金博页面版: 流式细胞基本知识Q

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内容提示: 流式细胞基本知识 Q&A 1、 流式细胞仪上的 FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的? FL2-W 是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H 是指脉冲高度。 通常在做细胞周期分析时应用, 用于去除粘连细胞。 2、 流式同型对照怎样选择? 同型对照(Isotype Control) : 使用与一抗相同种属来源、 相同亚型、 相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白, 用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。 如果一抗是多抗,可以用 an normal serum(与一抗相同的正常血清) (must be the same species as primary antibody) 。 This control is easy to achieve and can be u...

文档格式:DOC | 页数:10 | 浏览次数:20 | 上传日期:2014-11-02 04:35:17 | 文档星级:
流式细胞基本知识 Q&A 1、 流式细胞仪上的 FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的? FL2-W 是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H 是指脉冲高度。 通常在做细胞周期分析时应用, 用于去除粘连细胞。 2、 流式同型对照怎样选择? 同型对照(Isotype Control) : 使用与一抗相同种属来源、 相同亚型、 相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白, 用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。 如果一抗是多抗,可以用 an normal serum(与一抗相同的正常血清) (must be the same species as primary antibody) 。 This control is easy to achieve and can be used routinely in immunohistochemical staining.这个可以咨询试剂商。 同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。 由于荧光标记单抗的组来源不同, 应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。 举个例子: 比如检测一抗为单抗的 mouse anti rat CD11b, clone OX-42 purified IgG, 那么它的 isotype 是 mouse IgG2a, 所以可以用 purified(纯化的) mouse IgG2a 来做 OX-42 的同型对照(Isotype Control) 。 一般的的生物技术公司和国内的代理都有出售。 同型对照: 是指与 MoAb 相同的、 未免疫小鼠的免疫球蛋白亚类, 若使用直接免疫荧光染色法, 同型对照也应标记荧光色素, 如 IgG1 FITC、 IgG2a 、 PE 等。 主要考虑了细胞的自发荧光、 FC 受体介导的抗体结合和非特异性抗体结合等影响因素。 此外, 同型对照与 MoAb 所标记的荧光色素、 浓度、 F: P 比值(标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值) 应该相同为最佳, 这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义, 切忌使用与 MoAb 不相匹配的同型对照, 最好为同一实验室、 采用相同工艺或方法制备(如同一品牌) 的产品。 3、 流式细胞技术测定细胞内游离钙浓度为何要使用氯化钙.在文献及其他专业网站中都有测定游离

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