188宝金博页面版

2008年第J 期植物检疫PLAN T Q U ARAN TIN E快速检测单头柑橘木虱体内黄龙病病原木李菁-· 2冯旭祥· ，，徐建华t邓晓玲¨ ’( 1．华南农业大学资源环境学院植物病理系2．广西壮族自治区植保总站3．广州番禺出入境检验检疫局)Asi m pl eand effecti ve m ethod forqui ckdetecti on ofH uangl ongbi ng agentfromAsi ati cpsyl l i d( Di aphori naci tri )．Li J i n91一，Feng Xuxi an91· 3XuJ i anhual ，D eng Xi aol i n91( 1．Departm entof Pl antPathol ogy，SouthChi naAgri cul tural U ni versi ty, G uangzhou510640；2．Pl antProtecti on G eneralRegi on；3．Panyu Entry—Exi t Inspecti onandQ uaranti ne Bureau，G uangzhou)Stati on ofG uangxi ZhuangAutonom ousAbstractAsi ati c ci truspsyl l i d(D／aphor／naci rriKuw ayam a) i s currentl ytheonl yi nsect vector i denti fi ed tO transm i tci trusH uangl ongbi ng( H LB) pathogenandi s one of the m osti m portant pestsi n ci trusproducti on．Throughthefeedi ng process，ci trus psyl l i ds acqui mthe H LBagentf romi nfected sources and transm i t thepathogentoheal thyfl ees，eventual l y l eadi ngto a H LBepi dem i ci fno control m easure i s taken．D etecti on of H LBagentfrom ci truspsyl l i di s ofparti cul ar i m portancefor the di sease contr01．In thi sstudy，through adopti nga newm ethod forsam pl i ngofci truspsyl l i dandcarryi ngoutgeneral PCR，theH LBagentcoul d be detected f romsi ngl eci truspsyl l i d．After usi ngtO cut the PCRam pl i fy productof the H LBagent’ S16S rD N A，tw opi ecesof segm ent w hi ch are520bpand640bpcoul d be obtai n．The resul t i ndi cates theagent bel ongstOCandi datus Li beri bacter asi ati cus．Thi s m ethodhastheadvanm gesofbei ng si m pl e，conveni entand fast over theprevi ousl y descri bedproceduresi n detecti on of H LBXbaIagentf romci truspsyl l i ds．Keyw ords Asi ati cpsyl l i d，Ci trus H uangl ongbi ng，Detecti on摘要本研究通过采用简易的柑橘木虱制样方法，利用PCR检测技术在单头柑橘木虱体内检测到黄龙病病原，并利用XbaI限制性内切酶将从柑橘木虱体内扩增的黄龙病病原16SrDN A酶切成520bp和640bp两个片段，证实了木虱体内黄龙病病原为亚洲种。本研究成功地建立了一套快速检测柑橘木虱体内黄龙病病原的方法，可为检疫工作者和相关研究人员提供重要参考。关键词柑橘黄龙病柑橘木虱检测中图分类号$432．41柑橘黄龙病(Ci trus H uangl ongbi ng)是一种世界性的毁灭性病害，是我国检疫性有害生物之一，对柑橘生产：骩11。该病害是由一种限制于韧皮部筛管细胞内的难培养细菌所引起的，称为韧皮部杆菌属。在2004年以前，柑橘黄龙病仅在亚洲、非洲的国家和地区发生【2I。但在2004年5月和2005年9月分别在巴西圣保罗州和美国佛罗里达州发现了黄龙病【31。由于巴西和美国是世界柑橘生产的大国，目前柑橘黄龙病的研究工作受到世界各国的高度重视。柑橘黄龙病最早是在我国广东省汕头地区开始发现【41，20世纪60年代随着柑橘生产的发展，该病害发生逐渐严重，在广东、广西、福建、海南及台湾等省的柑橘产区广泛蔓延，摧毁了大量的柑橘树【研。20世纪80年代以后，又在江西、浙江、四川、云南、贵州和湖南等省的部分柑橘产区陆续发现黄龙。布觳棵偶忧苛硕愿貌『Φ募煅榧煲吖ぷ，防止了病害的扩散蔓延【61。柑橘黄龙病的传播途径除人为嫁接带病接穗和‘ 基金项目：广东省自然科学基金( 06025850) I广东省科技攻关项目( 2004820901010)” 通讯作者：E-m ai l ：xl deng@ scau．edu．∞收稿日期：2007-06-25 万方数据