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中国农业科学 2011,44(3):477-484 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.03.006 收稿日期： 2010-07-05； 接受日期： 2010-09-20 基金项目： 国家自然科学基金（30971897） 联系方式： 熊 艳， Tel： 023-68250517； E-mail： xiongyan7788@126.com。 通信作者青 玲， Tel： 023-68250517； E-mail： qling99@yahoo.com.cn。通信作者周常勇， E-mail: changyong@hotmail.com 四川番茄黄化曲叶病病原分子鉴定及变异分析 熊 艳1， 杨 帅1， 青 玲1， 2， 周常勇1， 2， 孙现超1， 杨水英1 （1西南大学植物保护学院重庆市植物病害生物学重点实验室， 重庆 400716；2中国农业科学院柑橘研究所， 重庆 400712） 摘要： 【目 的】 明确引 起四川番茄黄化曲叶。 Tomato yellow leaf curl disease， TYLCD） 的病原。 【方法】对采自 四川攀枝花市田间表现矮化、 黄化和曲叶症状的番茄植株 SC64-67， 通过 PCR、 克隆及测序等技术获得病毒及卫星 DNA 的全基因组序列， 并对序列进行变异分析。【结果】 利用双生病毒简并引 物 PA/PB 从 4 个样品中均扩增得到约 500 bp 的片段， 随机选择 SC65 进行 DNA-A 全基因组扩增和序列测定， 该 DNA 分子全长为 2 732 nts， 系统进化分析表明， 其与已报道的中国番茄黄化曲叶病毒（ Tomato yellow leaf curl China virus, TYLCCNV） 来自 云南元谋的菜豆分离物（ TYLCCNV-Bean-YM） 的核苷酸序列相似性最高， 为 96. 0%。 检测发现， 所有分离物均伴随有卫星 DNAβ 分子。 全序列测定表明 SC65 DNAβ 全长 1 338 nts， 与分离自 云南楚雄番茄上的 TYLCCNV-Y25 伴随的卫星 DNAβ 亲缘关系 最近， 核苷酸序列相似性为 77. 5%。 【结论】 研究表明四川 番茄黄化曲 叶病样品 均受到TYLCCNV/DNAβ 病害复合体的侵染， 但其病毒 DNA-A 和卫星 DNAβ 分子来源于 TYLCCNV 的不同分离物。 关键词： 番茄； 四川。 番茄黄化曲叶。 中国番茄黄化曲叶病毒； 卫星 DNAβ Molecular Identification and Variation Analysis of the Pathogen Causing Tomato Yellow Leaf Curl Disease in Sichuan Province XIONG Yan1, YANG Shuai1, QING Ling1， 2, ZHOU Chang-yong1， 2, SUN Xian-chao1, YANG Shui-ying1 (1Chongqing Key Laboratory of Plant Disease Biology, College of Plant Protection, Southwest University, Chongqing 400716; 2Citrus Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Chongqing 400712) Abstract: 【Objective】 In this study, pathogenic agents associated with tomato yellow leaf curl disease in Panzhihua, Sichuan Province in China were identified. 【Method】 Diseased tomato plants exhabiting typical stunting, yellowing and leaf-curling symptoms were collected in Panzhihua, Sichuan Province. Using PCR, cloning, and sequencing techniques a begomovirus disease complex associated with tomato was identified for phylogenetic analysis. 【Result】 500 bp fragments were amplified from four samples (SC64-67) using the begomovirus degenerate primer pair PA/PB. The complete nucleotide sequence of isolate SC65 was determined to be 2 732 nts and shared the highest sequence identity (96.0%) with an isolate of Tomato yellow leaf curl China virus (TYLCCNV-Bean-YM) isolated from kidney bean in Yuanmou, Yunnan Province. All tomato samples were found to be associated with the satellite DNAβ molecules. The satellite DNAβ molecule associated with SC65 (SC65 DNAβ) consisted of 1 338 nts and shared 77.5% nucleotide sequence identity with DNAβ associated with TYLCCNV-Y25 isolated from tomato plants in Chuxiong, Yunnan Province. 【Conclusion】 These results suggested that tomato yellow leaf curl disease in Sichuan Province is associated with the TYLCCNV/DNAβ disease complex which may originate from DNA-A and DNAβ molecules of different TYLCCNV isolates. Key words: tomato (Lycopersicon esculintum Mill.); Sichuan Province; tomato yellow leaf curl disease; Tomato yellow leaf curl China virus; satellite DNAβ