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188宝金博页面版: 【最新2014-2015】全人源食管癌单链抗体scFv基因文库的构建-医学论文
内容提示: 全人源食管癌单链抗体 scFv 基因文库的构建 【摘要】 目的制备全人源化食管癌单链抗体 scFv 基因文库。 方法取食管癌病人癌肿周围淋巴结作为 B 细胞的来源, 提取总 RNA, 用RTPCR 的方法获得抗体可变区基因 cDNA 文库。 首先分别网格筛选确定扩增 VH 和 VL 基因片段的引物对, 以 cDNA 为模板扩增 VH和 VL 基因 片 段, 再以 它 们 为 模板分 别 扩增 VHlinker 与VLlinker, 用 SOEPCR 技术将它们拼接成 scFv,再引入酶切位点 Sfi I 和 Not I, 胶回收 PCR 产物获得 scFv。 将 scFv 基因克隆入噬菌粒载体 pCANTAB5E 后电转入 Ecoli TG1。 PCR 法鉴...
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