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188宝金博页面版: 原位杂交探针的制备
内容提示： 原位杂交探针制备步骤 1. 转录模板的选。貉∪∧康幕蛑150-1200bp 长短的无ployA尾巴的非保守区段为模板。如果模板长度大于 500bp, 杂交前需要将探针进行温和碱水解，小于 500bp 探针杂交前则可不进行碱解。 2. 转录模板的制备：因为转录模板的纯度直接影响着探针合成的质量和数量，所以一般用质粒纯化试剂盒提取质粒。 首先，将模板 DNA 片断连接到 pGEM-T easy 克隆载体上, 转化大肠杆菌，经酶切或 PCR 鉴定甚至测序以后，挑取目的克。０遄詈梦聪蛄，将来用 T7 转录酶合成 anti－sense探针，用 SP6 转录酶合成 sense 探针。模板正向连接时用 SP6 转录酶合成 ...
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