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ｄ ｏ ｉ： １０ ． ３９ ６９ ／ｊ． ｉｓｓｎ ． １０ ０ ０ ４ ８ ４ Ｘ ． ２０ １３． ０ ８ ． ０ １８中国免疫学杂志２０ １３年第２９ 卷纳米粒子． ｓｉＲ Ｎ Ａ 复合物抑制脐血树突状细胞Ｓ ｏ Ｃ Ｓ ｌ基因表达的实验研究①于鸿徐广伟魏天雪陈智嘉（ 吉林省肿瘤防治研究所， 长春１３０ ０ １２）中国图书分类号Ｒ ３９ ２． ９文献标识码Ａ文章编号１０∞４ ８４ ｘ （ ２０１３）嬲鹏６０Ⅲ７［ 摘要］目的： 构建复合纳米粒子载体， 传递ｓｉＲ Ｎ Ａ 序列， 抑制脐血树突状细胞ｓｏ ｃｓｌ基因表达。 方法： 构建Ｐ Ｅ Ｉ包覆的以Ｓ ｉ０ ： 和Ｆ ｅ， ０ 。 为主要成分的复合纳米粒子载体， 以Ｌ ｉｐ ｏ ｆ ｅｃｔａ ｍ ｉｎ ｅ删２０ ０ ０ 为对照， 琼脂糖凝胶电泳检测纳米粒子． ｓｉＲ Ｎ Ａ 的结合效率； 荧光显微镜和流式细胞术检测纳米粒子． ｓＯ ｃｓｌ—ｓｉＲ Ｎ Ａ 序列被细胞摄人的效率： ｗ ｅｓｔｅｍ ｂ ｌｏ ｔ检测纳米粒子一ｓｉＲ Ｎ Ａ复合物转染脐血树突状细胞后对ｓＯ Ｃ ｓｌ基因表达的抑制。 Ｍ ， ＩＴ Ｉ’ 法检测纳米粒子一ｓｏ ｃｓｌ—ｓｉＲ Ｎ Ａ 处理的脐血Ｄ ｃｓ对肿瘤细胞的杀伤活性。 结果： 纳米粒子可以高效结合ｓｉＲ Ｎ Ａ 序列， 纳米粒子一ｓＯ ｃｓｌ一ｓｉＲ Ｎ Ａ 序列可被脐血树突状细胞摄。 但是单独的纳米粒子抑制Ｓ ０ ｃｓｌ基因表达效率比较低， 在外加磁场的作用下， 基因沉默作用显著增强， 抗肿瘤作用也相应提高。 结论： 纳米粒子载体传递ｓｊＲ Ｎ Ａ 安全性好， 效率高， 可以高效沉默脐血树突状细胞ｓｏ ｃｓｌ基因表达， 能为设计更有效的以树突状细胞为基础的抗肿瘤疫苗提供新思路和实验依据。［ 关键词］树突状细胞； 纳米粒子； ｓｏ ｃｓｌ； Ｒ Ｎ Ａ 干扰Ｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅ － ｓｉＲ Ｎ Ａ ｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓｉｎ ｈ ｉｂ ｉｔ Ｓ Ｏ Ｃ Ｓ ｌｇ ｅ ｎ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓｓｉｏ ｎ ｏ ｎ ｃ ｏ ｒ ｄ ｂ ｌｏ ｏ ｄｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓⅢ舶昭， Ｘ ＵＧ Ｍ ｏ凡ｇ一耽ｉ， 肼ｆ， 孔鲫一Ｘ Ｍ ｅ， Ｃ 删劢ｉ一施． 以耽胁， ｉｎｃｅ死啪ｒ胁疵Ｍ 把， 吼口咿＾“凡１３００１２， 吼ｉｍ［ Ａ ｂｓｔｒａ ｃｔ］ｏ ｂ ｊｅｃｔｉｖ ｅ： Ｔ ｂｃ ｏ ｎ ｓｔｒ ｕ ｃ ｔｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｎ ｉｃ ｌｅ ｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓａ ｎ ｄｄ ｅｌｉＶ ｅｒ ｙｓｉＲ Ｎ Ａｓｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅｓ ｏ ａ ｓ ｔｏ ｉｎ ｈ ｉｂ ｉｔ ｓｏ ｃ ｓｌｇ ｅ ｎ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ—ｓｉｏ ｎ ｏ ｎ ｃ ｏ ｒ ｄ ｂ ｌｏ ｏ ｄ ｄ ｅｎ ｄ ｒ ｉｔｉｃ ｃｅＩＩｓ．Ｍ ｅｔｈ ｏ ｄ ｓ： Ｓ ｙ ｎ ｔｈ ｅｓｉｚｅｄ ｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅ ｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓ ｕ ｓｉｎ ｇ Ｓ ｉ０ ２ａ ｎ ｄＦ ｂ ３０ ４ ｅ ｎ ｖ ｅ ｌｏ ｐ ｅ ｄｂ ｙＩ）Ｅ Ｉ．Ｕ ｓｉｎ ｇ Ｌ ｉｐ ｏ —ｆ ｅ ｃ ｔａ ｍ ｉｎ ｅ Ｔ Ｍ ２０ ０ ０ ａ ｓ ｃ ｏ ｎ ｔｒ ｏ ｌ， ａ ｇ ａ ｒ ｏ ｓｅ ｇ ｅｌ ｅｌｅｃｔｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｒ ｅｓｉｓ ａ ｎ ａ ｌｙ ｚ ｅ ｄｔｈ ｅｅ ｍ ｃ ｉｅ ｎ ｃ ｙｏ ｆｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅ —ｓｉＲ Ｎ Ａｃ ｏ ｒ ｒ ｌｂ ｉｎ ａ ｔｉｏ ｎ ； Ｆ ｌｕ ｏ ｒ ｅ ｓｃ ｅ ｎ ｃ ｅｍ ｉ—ｃ ｒ ｏ ｓｃ ｏ ｐ ｙａ ｎ ｄ ｎ ｏ ｗｃ ｙ ｔｏ ｍ ｅ ｔｒ ｙｅ ｘ ａ ｍ ｉｎ ｅ ｄ ｔｈ ｅ ｃｅｌｌｕ ｌａ ｒｕ ｐ ｔａ ｋ ｅｏ ｆｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅ —ｓｉＲ Ｎ Ａｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓ； Ｗ ｅ ｓｔｅ ｍｂｌｏ ｔａ ｓｓａ ｙｄ ｅ ｔｅ ｃ ｔｅ ｄｔｈ ｅｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓｓｉｏ ｎｏ ｆ Ｓ Ｏ Ｃ Ｓ ｌ ｐ ｒ ｏ ｔｅ ｉｎｂ ｅｆ ｏ ｒ ｅ ａ ｎ ｃＬ ／ｏ ｒ ａ ｆ ｔｅｒＤ Ｃ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｔｒ ｅａ ｔｅｄ ｗ ｉｔｈｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅ —ｓｉＲ Ｎ Ａｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓ； Ｍ Ｔ Ｔａ ｓｓａ ｙｅ ｖ ａ ｌｕ ａ ｔｅ ｄ ｔｈ ｅ ａ ｎ ｔｉｔｕ ｍ ｏ ｒ ａ ｃｔｉＶ ｉ—ｔｉｅｓ ｏ ｆｅ ｆ ｋ ｃ ｔｏ ｒｃｅｌｌｓ ｓｔｉｍ ｕ ｌａ ｔｅ ｄｂ ｖ Ｄ Ｃ ｓ． Ｒ 鹳ｕ Ｉｔｓ： Ｃ ｏ ｍ ｐ ａ ｒ ｅ ｄｗ ｉｔｈ ｔｈ ｅｃｏ ｎ ｔｒ ｏ ｌｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ， ｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅ ｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓｃ ａ ｎｅ ｍ ｃ ｉｅ ｎ ｔｌｙｃ ｏ ｍ ｂ ｉｎ ｅ ｔｈ ｅｓｉＲ Ｎ Ａｓｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ．Ｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅ ． ｓｉＲ Ｎ Ａｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓｗ ｅ ｒ ｅｕ ｐ ｔａ ｋ ｅ ｄ ｂ ｙｃ ｏ ｒ ｄ ｂ ｌｏ ｏ ｄ ｄ ｅｎ ｄ ｒ ｉｔｊｃ ｃｅｌｌｓ．Ｈ ｏ ｗ ｅ ｖ ｅ ｒ ， Ｄ Ｃ ｓｔｒ ｅａ ｔｅｄ ｗ ｉｔｈｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｒ ｔｉｃ ｌｅｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓａ ｌｏ ｎ ｅ ｉｎ ｓｉｆ ｍ ｉｆ ｉｃａ ｎ ｔｌｖｉｎ ｈ ｉｂ ｉｔ Ｓ Ｏ Ｃ Ｓ ｌｇ ｅ ｎ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓｓｉｏ ｎ ； ｉｎａ ｄ ｄ ｉｔｉｏ ｎ ｔｏ ｔｈ ｅ ｅ ｘ ｔｅ ｍ ａ ｌ ｍ ａ ｇ ｎ ｅ ｔｉｃｆ ｉｅ ｌｄ ， Ｓ Ｏ Ｃ Ｓ ｌ ｇ ｅ ｎ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓｓｉｏ ｎｗ ｅ ｒ ｅｓｉｇ ｎ ｉ６ ｃａ ｎ ｔｌｖ ｒ ｅ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ， ａ ｎ ｄ ｐ ａ ｒ ａ ｌｌｅｌｅｄｗ ｉｔｈ ｔｈ ｅ ｅ ｎ ｈ ａ ｎ ｃ ｅ ｄ ａ ｎ ｔｉｔｕ ｍ ｏ ｒａ ｃ ｔｉｖ ｉｔｉｅ ｓ ｏ ｆ ｅ ｆ ｋ ｃ ｔｏ ｒ ｃｅｌｌｓ ｓｔｉｍ ｕ ｌａ ｔｅ ｄｂ ｙ Ｄ Ｃ ｓ． Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌｕ ｓｉｏ ｎ ： Ｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｎ ｉ—ｃｌｅ ｃ ｏ ｍ ｐ ｌｅ ｘ ｅ ｓｓｈ ｏ ｗ ｅ ｄ ｓａ ｆ ｅｔｖａ ｎ ｄｈ ｉｇ ｈｅ ｍ ｃ ｉｅ ｎ ｃ ｙｉｎ ｓｉＲ Ｎ Ａｓｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅｄ ｅｌｉｖ ｅｒ ｙｉｎｖ ｉｔｍ ． Ｔ ｈ ｅｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓｓｉｏ ｎｏ ｆ Ｓ Ｏ Ｃ Ｓ ｌｇ ｅ ｎ ｅｏ ｎ ｃ ｏ ｒ ｄ ｂ ｌｏ ｏ ｄ ｄ ｅｎ —ｄ ｒｉｔｉｃ ｃ ｅ Ｕ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｓｉ群１ｉｎ ｃａ ｎ ｔｌｙ ｓｉｌｅ ｎ ｃ ｅ ｄｂ ｙ ｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｎ ｉｃ ｌｅ —ｓｉＲ Ｎ Ａ ｃｏ ｍ ｐ ｌｅｘ ｅｓ．Ｔ ｈ ｅ ｒｅｓｕ ｌｔｓ ｐ ｒ ｅ ｓｅ ｎ ｔｅ ｄｉｎ ｔｈ ｉｓｓｔｕ ｄ ｙ ｐ ｒ ｏ Ｖ ｉｄ ｅ ｄａ ｎ ｅ ｗｗ ａ ｙｏ ｆｔｈ ｉｎ ｋ ｉｎ ｇａ ｎ ｄｅ ｘ ｐ ｅ ｄ ｍ ｅ ｎ ｔａ ｌ ｂ ａ ｓｉｓ， ｗ ｈ ｊｃ ｈａ ｒ ｅｅ ｘ ｐ ｅ ｃ ｔｅ ｄｔｏ ｂ ｅ ｕ ｓｅｆ ｈ ｌ ｆ ｏ ｒｄ ｅ ｓｉｇ ｎ ｉｎ ｇｍ ｏ ｒ ｅ ｅｆ ｆ ｅｃｔｉＶ ｅ ｄ ｅｎ ｄ ｒ ｉｔｉｃ ｃｅｌｌ一ｂ ａ ｓｅｄａ ｎ ｔｉｔｕ ｍ ｏ ｒ ｉｍ ｍ ｕ ｎ ｏ —ｔｈ ｅ ｒ ａ ｐ ｅ ｕ ｔｉｃ ｓｔｍ ｔ６９ ｉｅｓ．［ Ｋ ｅ ｙ ｗ ｏ Ｈ Ｉｓ］Ｄ ｅ ｎ ｄ ｒ ｉｔｉｃ ｃ ｅ Ｉｌｓ； Ｎ ａ ｎ ｏ ｐ ａ ｎ ｉｃ ｌｅ ； ｓｏ ｃ ｓｌ； Ｒ Ｎ Ａｉｎ ｔｅｒ ｆ ｅｒ ｅｎ ｃｅ树突状细胞（ Ｄ ｅｎ ｄ ｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ， Ｄ Ｃ ｓ）的特点是捕获和提呈抗原的能力高， 可迁移到淋巴器官， 并表达抗原特异性淋巴细胞活化所需的各种共刺激分子。近年来随着对树突状细胞及其抗肿瘤作用的深入研究． 新的功能靶分子和新技术手段为其临床应用提供了更广阔的前景。 已经证明细胞因子信号抑制因①本文为吉林省卫生厅课题（ ２０ １０ ２０ ３６ ）作者简介： 于鸿（ １９ ６９ 年一）， 女， 硕士， 副研究员， 主要从事分子生物学和肿瘤生物治疗研究， Ｅ —ｍ ａ ｉｌ： ｙ ｕ ｈ ｏ “ｇ ｎ ｅｗ ＠ ｙ ａ ｈ （ “子１（ Ｓ ｕ ｐ ｐ ｒｅｓｓｏ ｒｏ ｆｃ ｙ ｔｏ ｋ ｉｎ ｅ ｓｉｇ ｎ ａ ｌｉｎ ｇ ， Ｓ Ｏ Ｃ Ｓ ｌ）在调控树突状细胞的功能， 抑制炎症性疾病和系统性自身免疫中发挥重要的作用。 ｓＯ Ｃ ｓｌ作为一个各种细胞因子如ＩＦ Ｎ ． ＾ｙ 、 ＩＬ － ２、 ＩＬ ＿ ６、 ＩＬ － ７ 、 ＩＬ 一１２或ＩＬ —１５负调控的信号， 通过抑制Ｊａ ｎ ｕ ｓ激酶（ ＪＡ Ｋ ｓ）在Ｔ 细胞和其他的免疫细胞中发挥作用［ １］。 Ｓ Ｏ Ｃ Ｓ ｌ基因沉默导致Ｄ ｃｓ的ＩＬ —１２信号和下游细胞因子网络不受约束． 从而导致宿主水平自身耐受的打破和自身免疫性病理反应Ｌ ２Ｊ。 Ｒ Ｎ Ａ 干扰（ Ｒ Ｎ Ａ ｉｎｔｅ出ｒｅｎｃｅ，Ｒ Ｎ Ａ ｉ）是对基因的序列特异性抑制的新兴技术之万方数据