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·论著·ｍｉＲＮＡ － １５ｂ对人脑胶质瘤细胞侵袭能力的抑制作用孙 关 　 许 进 　 聂德康 　 郭 俊 　 李 民【摘要】 　 目的 　 观察微小 ＲＮＡ － １５ｂ （ ｍｉＲＮＡ － １５ｂ ）对人脑胶质瘤细胞株 Ｕ８７ 细胞侵袭能力的影响。方法 　 体外培养 Ｕ８７ 细胞，分为空白对照组、阴性对照组和 ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 寡聚核苷酸拟似物处理组（ ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 组）。实时荧光定量 ＰＣＲ 检测ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 表达水平， Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ 小室实验检测细胞侵袭能力， Ｗｅｓｔｅｒｎ。猓欤铮 实验检测细胞侵袭相关蛋白 Ｒａｓ 相关 Ｃ３ 内毒素底物 １ （Ｒａｃ１ ）和 Ｒａｃ３ 表达水平。结果 　 脂质体转染 Ｕ８７ 细胞 ４８ｈ 后， ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 组细胞 ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 相对表达量高于阴性对照组和空白对照组（ １８．４７±２．３１ｖｓ．１２．７５±１．９８ 和 １１．２２±１．３２ ）（Ｐ ＜０．０５ ）； ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 组细胞穿过人工基底膜数少于阴性对照组和空白对照组［（ １１．０±１．８）个 ｖｓ． （ ３４．０±５．１ ）个和（３２．０±４．８ ）个］（ Ｐ ＜０．０５ ）； ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 组 Ｕ８７ 细胞中 Ｒａｃ１ 和 Ｒａｃ３ 蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组下降（ Ｐ ＜０．０５ ）。结论 。恚椋遥危 － １５ｂ 可通过下调 Ｒａｃ１ 和 Ｒａｃ３ 蛋白表达抑制 Ｕ８７ 细胞的侵袭能力。【关键词】 　　 微小核糖核酸１５ｂ ；胶质瘤； Ｒａｓ相关 Ｃ３内毒素底物１【中图分类号】 。遥罚常埂　 【文献标识码】 。痢　 【文章编号】 。埃玻担 － ３６８５ （ ２０１６ ） ０９ － ０９９７ － ０３Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　 ｅｆｆｅｃｔ。铮妗。恚椋悖颍铮遥危 － １５ｂｏｎ。椋睿觯幔螅椋铮睢。幔猓椋欤椋簦。铮妗。纾欤椋铮恚帷。眨福罚悖澹欤欤蟆。椋睢。觯椋簦颍铩 ＳＵＮ 　 Ｇｕａｎ ， ＸＵ 　 Ｊｉｎ ，ＮＩＥ 　 Ｄｅｋａｎ ｇ ， ｅｔ 　 ａｌ ． Ｄｅ ｐ ａｒｔｍｅｎｔ 　 ｏ ｆ 　 Ｎｅｕｒｏｓｕｒ ｇ ｅｒ ｙ ， Ｆｉｒｓｔ 　 Ｐｅｏ ｐ ｌｅ ’ ｓ 　 Ｈｏｓ ｐ ｉｔａｌ 　 ｏ ｆ 　 Ｙａｎｃｈｅｎ ｇ ， Ｙａｎｃｈｅｎ ｇ２２４００１ ， ＣＨＩＮＡ【 Ａｂｓｔｒａｃｔ 】 。希猓辏澹悖簦椋觯濉。裕铩。椋睿觯澹螅簦椋纾幔簦濉。簦瑁濉。澹妫妫澹悖簟。铮妗。恚椋悖颍铮遥危 － １５ｂ （ ｍｉＲＮＡ － １５ｂ ） ｏｎ。簦瑁濉。椋睿觯幔螅椋铮睿幔猓椋欤椋簦 ｏｆ。纾欤椋铮恚帷。眨福罚悖澹欤欤蟆。椋睢。觯椋簦颍铮停澹簦瑁铮洌蟆。裕瑁濉。瑁酰恚幔睢。纾欤椋铮恚帷。眨福罚悖澹欤欤蟆。悖酰欤簦酰颍澹洹。椋睢。觯椋簦颍铩。鳎澹颍澹洌椋觯椋洌澹洹。椋睿簦铩。簦瑁颍澹濉。纾颍铮酰穑蟆。铮妗。 （ ｔｒｅａｔｅｄ。鳎椋簦琛。恚椋遥危 － １５ｂｍｉｍｉｃｓ ）， Ｂ （ ｎｅｇａｔｉｖｅ。悖铮睿簦颍铮 ） ａｎｄ。 （ ｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌ ） ．Ｔｈｅ。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。欤澹觯澹臁。铮妗。恚椋遥危 － １５ｂｗａｓ。洌澹簦澹悖簦澹洹。猓 ＲＴ － ＰＣＲ．Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ。幔螅螅幔 ｗａｓ。酰螅澹洹。簦铮洌澹簦澹颍恚椋睿濉。簦瑁濉。椋睿觯幔螅椋铮睢。幔睿洹。恚椋纾颍幔簦椋铮睢。幔猓椋欤椋簦椋澹蟆。铮妗。眨福罚悖澹欤欤螅裕瑁濉。澹穑颍澹螅螅椋铮睿蟆。铮妗。悖澹欤臁。椋睿觯幔螅椋铮 － ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓ。遥幔悖保幔睿洹。遥幔悖常鳎澹颍濉。澹幔恚椋睿澹洹。猓 Ｗｅｓｔｅｒｎ。猓欤铮簦遥澹螅酰欤簦蟆。茫铮恚穑幔颍澹洹。簦铩。纾颍铮酰穑蟆。铮妗。隆。幔睿洹。 ，ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ。欤澹觯澹臁。铮妗。恚椋遥危 － １５ｂｗａｓ。瑁椋纾瑁澹颉。椋睢。纾颍铮酰稹 Ａ （ １８．４７±２．３１ｖｓ．１２．７５±１．９８ａｎｄ。保保玻±１．３２ ）（ Ｐ ＜０．０５ ） ．Ｔｈｅ。恚澹恚猓澹颍蟆。铮妗。簦瑁濉。悖澹欤欤蟆。幔悖颍铮螅螅澹洹。簦瑁濉。幔颍簦椋妫椋悖椋幔臁。猓幔螅澹恚澹睿簟。恚澹恚猓颍幔睿濉。鳎幔蟆。欤澹螅蟆。椋睿纾颍铮酰稹 Ａ。簦瑁幔睢。簦瑁铮螅濉。椋睢。纾颍铮酰穑蟆。铮妗。隆。幔睿洹。 ［（１１．０±１．８ ） ｐｉｅｃｅｓ。觯螅 （ ３４．０±５．１ ） ｐｉｅｃｅｓ。幔睿 （ ３２．０±４．８ ）ｐｉｅｃｅｓ ］（ Ｐ ＜０．０５ ） ．Ｔｈｅ。澹穑颍澹螅螅椋铮睢。欤澹觯澹欤蟆。铮妗。遥幔悖保幔睿洹。遥幔悖常穑颍铮簦澹椋睿蟆。鳎澹颍濉。欤铮鳎澹颉。椋睢。纾颍铮酰稹。痢。簦瑁幔睢。簦瑁铮螅澹椋睢。纾颍铮酰穑蟆。铮妗。隆。幔睿洹。 （ Ｐ ＜０．０５ ） ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ。恚椋遥危 － １５ｂｃａｎ。椋睿瑁椋猓椋簟。簦瑁濉。幔猓椋欤椋簦 ｏｆ。纾欤椋铮恚帷。眨福罚悖澹欤欤蟆。椋睿觯椋簦颍铩。穑颍铮猓幔猓欤 ｖｉａ。簦瑁濉。洌铮鳎 － ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ。铮妗。遥幔悖保幔睿洹。遥幔悖常澹穑颍澹螅螅椋铮睿螅荆耍澹。鳎铮颍洌 】 　。恚椋悖颍铮遥危 － １５ｂ ； Ｇｌｉｏｍａ ； Ｒａｓ － ｒｅｌａｔｅｄ。茫常猓铮簦酰欤椋睿酰怼。簦铮椋睢。螅酰猓螅簦颍幔簦濉。薄　 基金项目：国家自然科学基金青年科学基金（ ８１２０１９７６ ）；江苏省自然科学基金（ ＢＫ２０１４１２５６ 、 ＢＫ２０１２６７０ ）；江苏省卫生厅科技项目（ Ｚ２０１３１８ ）作者单位： ２２４００１　 江 苏 。 城 市 第 一 人 民 医 院 神 经 外 科（孙 关、许 进、聂德康、郭 。荒暇┦薪医院神经外科（李 民）通信作者：李 民 。 － ｍａｉｌ ： ｓｂｎ１３３＠１６３．ｃｏｍ　　 胶质瘤是人类颅内恶性程度最高的肿瘤之一，易复发，难治愈。尽管近年对于胶质瘤的治疗，如显微外科、替莫唑胺同步放化疗等均有所进展，但其临床效果仍不尽理想 ［１ ］ 。近年来对微。遥危粒 （ ｍｉＲＮＡｓ ）与胶质瘤发生、发展分子生物学机制的研究为胶质瘤提供了新的生物治疗靶点 ［２ ］ 。有报道，ｍｉＲＮＡ － １５ｂ在人脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞系中表达水平明显低于正常脑组织 ［３ ］ ，提示 ｍｉＲＮＡ－ １５ｂ 可能与胶质瘤恶性程度相关。本研究采用 ｍｉＲＮＡ － １５ｂ 寡聚核苷酸拟似物上调 ｍｉＲＮＡ － １５ｂ在人脑胶质瘤细胞株Ｕ８７中的表达水平，观察其对胶质瘤细胞侵袭能力影响及其相关作用机制。材料与方法一、材料Ｕ８７细胞购自中科院上海细胞库。 Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００转染试剂购自美国Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司。 Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室购自 Ｃｏｒｎｉｎｇ　 Ｃｏｓｔａｒ公司， Ｍａｔｒｉｇｅｌ 基质胶购自·７ ９ ９· 江苏医药 ２０１６ 年 ５ 月第 ４２ 卷第 ９ 期 。剩椋幔睿纾螅酢。停澹洹。 ，Ｍａｙ。玻埃保 ， Ｖｏｌ。矗 ， Ｎｏ．９